车春晓 姜科宇 马媛媛 曾飒 周建业 李志强 何祥一.兰州大学口腔医学研究所，兰州 730000；.甘肃省口腔疾病研究重点实验室(西北民族大学)，兰州 730030

    针对变异链球菌的人源特异性靶向抗菌肽C16LL-37的生物学特性

    车春晓1姜科宇1马媛媛1曾飒1周建业2李志强2何祥一1

    1.兰州大学口腔医学研究所，兰州 730000；2.甘肃省口腔疾病研究重点实验室(西北民族大学)，兰州 730030

    [摘要]目的研究针对变异链球菌(S.mutans)的人源特异性靶向抗菌肽C16LL-37的生物学特性。方法通过标准固相合成技术(Fmoc保护法)合成人源抗菌肽LL-37、S.mutans感受态刺激肽(CSP)C端16个氨基酸组成的多肽CSPC16及二者的重组多肽C16LL-37；以LL-37、CSPC16为对照组，采用平板菌落计数法检测C16LL-37对S.mutans、黏性放线菌、大肠埃希菌、嗜酸乳杆菌、金黄色葡萄球菌的抗菌活性及其对S.mutans的靶向性。通过扫描电子显微镜(SEM)观察，浓度为32 μmol·L-1的C16LL-37作用后S.mutans的细胞形态学变化；利用酶联免疫吸附法测定C16LL-37的红细胞溶血率以及不同条件对C16LL-37抗菌活性的影响。结果1)C16LL-37对S.mutans的最小抗菌浓度为16 μmol·L-1，最小杀菌浓度为64 μmol·L-1。2)C16LL-37浓度为64 μmol·L-1时，作用30 min后S.mutans存活率为3.46%，作用60 min后细菌存活率降至0%，其他4种细菌在各时间的存活率均大于60%(P<0.05)。3)SEM观察：经C16LL-37 (32 μmol·L-1)作用后，部分S.mutans细胞形态出现不规则改变，部分细胞的细胞膜粗糙、细胞质外溢或出现细胞裂解。4)C16LL-37浓度不超过64 μmol·L-1时，红细胞溶血率低于0.33%，与阴性对照组无明显差异(P>0.05)。5)不同温度、pH值、盐浓度及低浓度胰蛋白酶处理后，C16LL-37的抗菌活性无明显变化(P>0.05)。结论C16LL-37对变异链球菌具有靶向特异性，并且具有较强的抗菌活性、较高的生物安全性及良好的稳定性。

    [关键词]变异链球菌； 感受态刺激肽； 抗菌肽； 特异性靶向抗菌肽

    Supported by: Fund for Less Developed Regions ofNatural Science Foundation of China (31160124/C0309);Natural Science Foundation of Gansu Province (1204FKCA16, 1308RJZA248).Correspondence: He Xiangyi, E-mail: hexy@lzu.edu.cn. ......