陈筑 宿凌恺

    1.贵阳市口腔医院牙体牙髓病科，遵义医学院附属贵阳口腔医院，贵阳 550002；2.浙江大学医学院附属口腔医院牙体牙髓病科，杭州 310000

    丹皮酚对牙龈卟啉单胞菌诱导骨髓来源巨噬细胞功能的影响

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    1.贵阳市口腔医院牙体牙髓病科，遵义医学院附属贵阳口腔医院，贵阳 550002；2.浙江大学医学院附属口腔医院牙体牙髓病科，杭州 310000

    目的 观察丹皮酚对牙龈卟啉单胞菌作用下对体外培养的小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMM)炎性因子分泌及向破骨细胞分化能力的影响，并探讨其作用机制。方法体外分离获得小鼠生长良好的BMM，加入不同浓度丹皮酚溶液处理1 h，再加入牙龈卟啉单胞菌进行24 h诱导刺激。采用流式细胞术检测炎症相关蛋白程序性死亡分子配体1(PD-L1)的表达量，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)及白细胞介素-6(IL-6)水平；在核因子κB受体活化因子配体(RANKL)和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)刺激后的BMM中加入不同浓度的丹皮酚溶液处理1 h后，加入牙龈卟啉单胞菌刺激，采用抗酒石酸性磷酸酶(TRAP)染色观察破骨细胞形成情况，Western blot检测破骨细胞形成相关蛋白TRAP和核因子κB受体活化因子(RANK)的表达。结果丹皮酚在10～50 μmol·L-1的范围内，对BMM无毒性作用。流式细胞术结果提示丹皮酚可以抑制牙龈卟啉单胞菌诱导PD-L1的表达，并存在剂量依赖效应。ELISA实验证明丹皮酚能以剂量依赖性方式抑制BMM释放TNF-α、IL-1β及IL-6(P<0.01)。牙龈卟啉单胞菌可以明显诱导BMM分化形成破骨细胞；TRAP染色显示丹皮酚各浓度组能抑制BMM向破骨细胞分化；Western blot结果显示丹皮酚抑制TRAP和RANK表达且存在剂量依赖效应。结论丹皮酚可以剂量依赖方式抑制牙龈卟啉单胞菌诱导的BMM炎性因子TNF-α、IL-1β及IL-6的分泌及其向破骨细胞分化的能力。

    丹皮酚； 牙龈卟啉单胞菌； 骨髓来源巨噬细胞； 破骨细胞； 炎症； 分化

    慢性牙周炎是导致成人失牙的最常见的慢性感染性炎症疾病[1]。牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis，P. gingivalis)是牙周炎的主要致病菌，被认为是牙周毒力最强的致病菌之一。牙龈卟啉单胞菌能产生大量毒力因子，参与牙周炎发生、发展及牙周组织的破坏过程[2-3]。在慢性牙周炎组织中 ......