杨小军 谭咏梅 田智慧 周婷 赵望泓 侯晋

    1.南方医科大学南方医院口腔科；2.南方医科大学口腔医学院，广州 510515

    细菌感染影响牙周组织细胞表达环鸟苷-腺苷合成酶的实验研究

    杨小军1,2谭咏梅1,2田智慧1,2周婷1,2赵望泓1,2侯晋1,2

    1.南方医科大学南方医院口腔科；2.南方医科大学口腔医学院，广州 510515

    目的 研究侵入牙周组织细胞内的细菌对细胞表达环鸟苷-腺苷合成酶(cGAS)的影响。方法将SYTO9标记的牙龈卟啉单胞菌(P. gingivalis)以感染复数(MOI)为10与人牙周膜细胞(hPDLCs)共培养24 h后，使用激光共聚焦显微镜观察P. gingivalis对hPDLCs的侵袭情况，并应用荧光标记活细胞筛选(FACS)分选出被P. gingivalis入侵的hPDLCs，利用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blot对hPDLCs中cGAS的表达变化进行检测。此外还利用免疫组织化学技术对细菌感染性牙龈组织和正常牙龈组织中cGAS表达定位和表达水平变化进行分析。结果激光共聚焦显微镜下观察，P. gingivalis和hPDLCs共培养24 h后，几乎所有的细胞内都可观察到绿色荧光；被P. gingivalis感染的hPDLCs中cGAS表达水平明显上调；在牙龈组织中cGAS主要在上皮细胞和上皮下组织中的炎性细胞中表达；且细菌感染性的牙龈组织中cGAS的表达水平明显高于正常牙龈组织。结论侵入hPDLCs内的活体P. gingivalis，可以明显上调细胞中cGAS的表达；且在细菌感染的炎性牙龈组织中cGAS的表达也明显升高。该结果提示cGAS可能参与了牙周组织细胞中细菌来源的病原dsDNA的识别。

    牙龈卟啉单胞菌； 人牙周膜细胞； 环鸟苷-腺苷合成酶； DNA感受器

    固有免疫应答是机体防御感染性疾病的第一道防线。在固有免疫过程中，宿主免疫细胞借助模式识别受体(pattern-recognition receptors，PRRs)迅速识别大量不同的病原体组分，通过激活下游信号转导通路，产生多种炎性细胞因子或Ⅰ型干扰素，发挥抗感染作用[1]。但是已有的大量研究[2]证明，过度的Ⅰ型干扰素反应与炎症性疾病和自身免疫性疾病的发生有着密切关系。现有的研究[3]结果已表明，细菌所产生的核酸类病原相关的分子模式(pathogenassociated molecular patterns，PAMPs)在宿主固有免疫信号的激活上发挥着重要作用 ......