祁佳佳孙艳袁昌青姜文静赵涵曹远盼刘秋艳

    1.青岛大学口腔医学院；2.青岛大学附属医院口腔科；3.病理科，青岛 266000

    CD44和CD133在口腔潜在恶性病变和口腔鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

    祁佳佳1孙艳1袁昌青2姜文静2赵涵3曹远盼1刘秋艳1

    1.青岛大学口腔医学院；2.青岛大学附属医院口腔科；3.病理科，青岛 266000

    目的 探究肿瘤干细胞标记物CD44和CD133在口腔正常黏膜、口腔潜在恶性病变(OPMD)及口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的表达情况及相互关系，评估其作为OPMD恶性转化早期诊断指标的临床价值。方法 回顾性分析60例OPMD患者、60例OSCC患者及10例口腔黏膜正常者的临床资料，采用免疫组织化学双重染色技术检测各组病理组织中CD44与CD133的表达，分析CD44和CD133表达之间的关系及其与各临床因素之间的关系。结果 口腔正常黏膜、OPMD、OSCC三组中，CD44的阳性表达率分别为100.00%、96.67%、71.67%(P1 材料和方法

    1.1 研究对象

    本研究回顾性分析2010年5月—2015年5月在青岛大学医学院附属医院经病理确诊的60例OPMD患者、60例OSCC患者及10例口腔黏膜正常患者的临床资料，主要包括性别、年龄、吸烟史、饮酒史、病变部位、鳞癌的临床分期、有无淋巴结转移等。所有患者之前均未接受过任何的治疗措施。其中60例OPMD患者包括口腔扁平苔藓30例、口腔白斑30例；60例OSCC患者中包括高、中、低分化鳞癌各20例。

    1.2 主要试剂

    CD133鼠抗人单克隆抗体(M iltenyi Biotechnology公司，德国)，CD44兔抗人多克隆抗体(Santa Cruz Biotechnology公司，美国)，Polymer双染试剂盒(北京中杉金桥生物技术有限公司)。

    1.3 方法

    收集患者病理组织标本，采用免疫组织化学双重染色技术分别检测各病理组织中CD44与CD133的表达情况。

    组织切片的制作和检测：所有蜡块标本均切片4张，厚度3 μm，贴于防脱片，60 ℃烘烤2 h备用。采用免疫组织化学双重染色Elivison法，对标本进行检测。CD44采用试剂公司提供的OSCC阳性组织作为阳性对照，CD133采用试剂公司提供的大肠鳞癌阳性组织作为阳性对照。磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline，PBS)代替一抗作为阴性对照，对照组与实验组切片在同一条件下同时进行久红/二氨基联苯胺(diam inobenzidine ......