何晓兰包广洁,2孙凌璐张雪保善英康宏

    1.兰州大学口腔医学研究所，兰州 730000；

    2.西北民族大学甘肃省口腔疾病研究重点实验室，西北民族大学口腔医学国家民委重点实验室，兰州 730030

    ·基础研究·

    不同体积分数氧气对山羊颞下颌关节盘细胞骨架改建的影响

    何晓兰1包广洁1,2孙凌璐1张雪1保善英1康宏1

    1.兰州大学口腔医学研究所，兰州 730000；

    2.西北民族大学甘肃省口腔疾病研究重点实验室，西北民族大学口腔医学国家民委重点实验室，兰州 730030

    目的探讨不同体积分数的氧气对山羊颞下颌关节盘细胞3种细胞骨架蛋白改建的影响。方法体外分离、培养山羊颞下颌关节盘细胞，传代至第2代，分别于常氧21%O2及低氧8%O2、4%O2、2%O2下培养。甲苯胺蓝、天狼星红及Ⅰ型胶原免疫细胞化学染色观察不同氧体积分数下细胞显型的变化。细胞免疫荧光染色和实时定量逆转录聚合酶链反应检测细胞骨架蛋白，包括肌动蛋白、微管蛋白和波形蛋白的表达情况。。结果不同氧体积分数下关节盘细胞仍然具有成纤维特性，3种细胞骨架蛋白有规律地排列。4%O2时，肌动蛋白和波形蛋白荧光强度最低(P<0.05)；2%O2时，微管蛋白荧光强度最高(P<0.05)，其他各组间差异无统计学意义(P>0.05)。检测肌动蛋白mRNA表达，21%O2组最高，而2%O2组和4%O2组最低(P<0.05)；微管蛋白mRNA表达在2%O2组最高，8%O2组最低(P<0.05)；波形蛋白mRNA表达，在4%O2组最低，21%O2组最高，差异有统计学意义(P<0.05)。结论在不同氧体积分数条件下，细胞骨架蛋白有不同程度的改建，2%O2可能是适合颞下颌关节盘细胞扩增的最佳氧体积分数。

    颞下颌关节盘； 低氧； 细胞骨架； 肌动蛋白； 微管蛋白； 波形蛋白

    颞下颌关节(temporomandibular joint，TMJ)的关节盘是位于下颌骨髁突和颞骨关节窝之间椭圆形的，质地致密且无血管的纤维软骨组织[1-3]，其正常代谢所需的营养物质，如氧和葡萄糖等，主要依靠关节滑液和连接到双板区血管的扩散完成[4]，因此关节盘被认为是处于生理性低氧环境中的组织[5]。

    颞下颌关节紊乱病(temporomandibular joint disorders，TMD)具有患病率高、慢性迁延、影响面广的特征[6]。无支架的自组装技术在修复TMD导致的关节盘缺损或替换受损的关节盘等方面有较好的应用前景[7]，但是选择合适的种子细胞仍是当前亟待解决的问题[8] ......