陈正岗 王树人? 李敬华 韩金宏 王奇民 童磊 刘文君杨芳 郭庆圆 郭大伟 王莹

    1.青岛市市立医院口腔科，青岛?266071；2.上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔颌面外科，上海?200011；3.胶州市人民医院口腔科，胶州?266300；4.青岛市市立医院中心实验室，青岛?266071；5.烟台市口腔医院，烟台?264008；6.青岛市市立医院耳鼻喉科，青岛?266071；7.济南市第四人民医院口腔科，济南?250031；8.潍坊医学院口腔医学院，潍坊?261021

    体外沉默二牛龙牛儿基转移酶Ⅰ对舌癌细胞迁移和侵袭的影响

    陈正岗1,2王树人3李敬华4韩金宏5王奇民1童磊1刘文君6杨芳1郭庆圆1郭大伟1王莹7,8

    1.青岛市市立医院口腔科，青岛?266071；2.上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔颌面外科，上海?200011；3.胶州市人民医院口腔科，胶州?266300；4.青岛市市立医院中心实验室，青岛?266071；5.烟台市口腔医院，烟台?264008；6.青岛市市立医院耳鼻喉科，青岛?266071；7.济南市第四人民医院口腔科，济南?250031；8.潍坊医学院口腔医学院，潍坊?261021

    目的 应用RNA干扰技术，体外沉默二牛龙牛儿基转移酶Ⅰ(GGTase-Ⅰ)，研究其在舌癌迁移、侵袭中的作用。方法 登录Genebank确定人GGTase-Ⅰ基因序列，针对GGTase-Ⅰ的基因序列设计并构建3条siRNA，分别将RNA干扰组(GGTase-Ⅰ?siRNA1、GGTase-Ⅰ?siRNA2、GGTase-Ⅰ?siRNA3)、阴性对照组(NC-siRNA)和空白对照组转染至舌癌细胞Cal-27，实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白质印迹法(Western?blot)检测各组细胞转染后GGTase-Ⅰ、RhoA基因的mRNA、蛋白表达；选取沉默效率最高的一组siRNA作为实验组，蛋白质印迹法检测各组细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的表达，GST-pull?down实验检测GTP-RhoA蛋白的表达，划痕实验检测细胞迁移能力变化，Transwell小室检测细胞侵袭能力变化。结果 干扰后细胞的GGTase-Ⅰ?mRNA、蛋白表达明显下降(Plt;0.05)，RhoA?mRNA和蛋白表达无明显改变，MMP-2、MMP-9、GTP-RhoA的表达下降，迁移、侵袭能力明显下降(Plt;0.05)。结论 抑制GGTase-Ⅰ表达，可降低舌癌细胞的迁移、侵袭能力，对GGTase-Ⅰ的深入研究可能为舌癌的治疗提供新的有效分子靶点 ......