余丽 刘旭倩 陈雨荷 陈潇 聂敏海

    1.西南医科大学口颌面修复重建与再生实验室，泸州 646000；

    2.西南医科大学附属口腔医院牙周黏膜科，泸州 646000；

    3.北海道大学齿学院口腔病态学分野口腔诊断内科学教室，日本北海道 060-0808；

    4.绵阳市口腔医院正畸科，绵阳 621000

    口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma，OSCC)是口腔颌面部常见的高侵袭性肿瘤[1]，也是人类的第6大恶性肿瘤，严重威胁着患者的生命健康和生存质量。OSCC约占头颈部肿瘤的95%[2]，占全身肿瘤的2%～4%以上[3]；OSCC患者的5年生存率仅为50%[4-5]。小分子锌指蛋白(LIM domain only proteins，LMO)[6]是核转录家族的共同调节子，在胚胎发育过程中调控细胞的增殖分化、组织形成和器官发育，LMO通过介导蛋白质之间及蛋白质与各种转录因子间的相互作用，促进或抑制基因转录；LMO可通过调控细胞周期促进肿瘤形成。LMO家族有4个成员[7]，LMO1、LMO2、LMO3、LMO4。LMO1主要由2个呈直线排列富含半胱氨酸的LIM结构域组成，可作为蛋白质相互作用的适配器，结合其他蛋白质形成复合体，破坏其原有结构，通过调控基因转录活性、细胞增殖分化促进肿瘤的侵袭转移[8-9]。李晓燕[10]在LMO1上调食管鳞癌的上皮间充质转化(epithelial mesenchymal transformation，EMT)的研究中发现，138例食管鳞状细胞癌组织和癌旁组织中LMO1的阳性表达率分别为86.9%和50.7%，LMO1在食管鳞状细胞癌中的表达明显高于癌旁组织(P< 0.001)。OSCC与食管鳞状细胞癌同属于上皮源性肿瘤，LMO1是否会促进口腔黏膜癌变，目前尚无相关研究，蛋白标志物作为肿瘤早期筛查的重要指标，筛选高灵敏度的标志物对肿瘤的研究和治疗具有重要意义。因此，本实验拟对4-硝基喹啉-N-氧化物(4-nitroquinoline N-oxide，4NQO)饮水法构建的SD大鼠口腔颊黏膜组织的mRNA和蛋白进行检测，以探究LMO1在OSCC发展进程中的作用。

    1 材料和方法

    1.1 主要材料和试剂

    PageRulerPrestained Protein Ladder、Veriti 96- Well聚合酶链式反应(polymerase chain reaction，PCR)仪、高速冷冻离心机、iBright CL1000蛋白印迹智能成像系统(Thermofisher公司 ......