刘志凯 乔翔鹤 苟黎明 李春洁

    1.口腔疾病研究国家重点实验室 国家口腔疾病临床医学研究中心 四川大学华西口腔医院头颈肿瘤外科，成都 610041；

    2.口腔疾病与生物医学重庆市重点实验室 重庆医科大学附属口腔医院，重庆 401147

    分支形态发生过程可见于哺乳动物的多种器官发生及发育过程中，这一分支形态的形成对于保证器官可以在有限的体积内获得最有效的功能形态具有重要意义，这一过程在多种器官(如肾、肺、下颌下腺等)中的具体发生及发展过程的研究已取得长足的进展[1-3]。最初对于这一过程的研究多是利用体内各发育阶段的器官进行组织切片及免疫组化染色来进行观察，但体外切片染色具有切片难度较大、形态不易维持等缺点。随着体外器官培养技术的发展，可以利用体外器官培养模型进行研究，便于直接地对相应器官上皮系统分支形态发生的具体过程进行连续地观察和干预[4]。

    下颌下腺是研究器官分支形态发生过程的重要模型，在小鼠胚胎中获取下颌下腺组织进行体外器官培养是一种重要的研究方法。小鼠下颌下腺位于小鼠下颌骨内侧稍下方，解剖皮肤及筋膜即可见(如图1所示)。对妊娠13 d(E13)的小鼠胚胎而言，其唾液腺组织处于发育初期，始见5～6个初始分支[5]。两侧腺体位于下颌体与下颌角转折处内侧，紧贴于舌根两侧，表面有下颌皮肤及软组织覆盖，因此较难定位及分离。本研究对小鼠胚胎下颌下腺的获取方法进行改良，以有效地定位腺体组织，降低腺体获取的难度，保证获取腺体的完整性，为培养奠定基础；同时建立小鼠胚胎下颌下腺的体外器官培养模型，以对其在体内发育过程中的分支形态发生过程进行更好体外的模拟。

    图 1 胚胎下颌下腺解剖位置(舌腹侧)Fig 1 Position of the embryonic submandibular salivarygland (ven- tral tongue side)

    1 材料和方法

    1.1 实验动物、主要试剂、器械及设备

    实验动物为健康清洁级适龄(6周～4月龄)ICR小鼠(雄性∶雌性为1∶2 ......