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编号:642973
长链非编码RNA PCGEM1通过转化生长因子β2/Smad2信号通路调控口腔鳞状细胞癌侵袭和转移的机制研究
http://www.100md.com 2020年10月12日 华西口腔医学杂志 2020年第5期
细胞株,荧光素酶,空白对照,1材料和方法,1组织标本,2细胞及主要试剂和仪器,3qRT-PCR检测lncRNAPCGEM1的表达,4分析lncRNAP
     翁旭 李劲松 范松

    1.汕头市中心医院口腔科,汕头 515031;2.中山大学孙逸仙纪念医院口腔科,广州 510120

    口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcino-ma,OSCC)是口腔癌的一种高发类型,发病率约占口腔癌的85%[1],具有发病迅速、转移率高等特点[2],但发病机制目前尚未完全明确。癌细胞的侵袭、转移是一个复杂过程,也是导致治疗失败和死亡的主要原因之一,因此寻找新的治疗靶点尤为迫切。长链非编码RNA(long-chain noncoding RNA,lncRNA)是一类不编码蛋白的RNA分子,长度介于200~100 000 nt[3]。研究[4]表明,lncRNA在肿瘤细胞周期、侵袭转移及化疗耐药等相关的信号通路方面均发挥调节作用,其作用类似于癌基因或抑癌基因。lncRNA PCGEM1是一种在前列腺癌细胞中特异性高表达的lncRNA,可促进前列腺癌细胞的增殖和迁移[5]。目前关于lncRNA PCGEM1在OSCC中的作用研究报道甚少,本研究探讨lncRNA PCGEM1对OSCC细胞增殖侵袭及迁移的影响。

    1 材料和方法

    1.1 组织标本

    收集2016年6月—2018年3月于汕头市中心医院接受手术治疗的80例OSCC患者的癌组织及距离癌组织超过2 cm处的正常组织,用以上组织构建组织芯片免疫组织化学染色,80例患者的组织标本中有20例出现了不同程度缺失,剩余60例经组织病理学检测证实为原发性OSCC,纳入本研究。60例患者年龄36~75岁,中位年龄53岁。所有患者均同意本研究并签署知情同意书,且经汕头市中心医院伦理委员会审核批准后收集标本。

    1.2 细胞及主要试剂和仪器

    人正常口腔黏膜上皮细胞(oral mucosa epithelial cell,OMEC)及人源OSCC细胞株KB、BcaCD885、SCC-4、CAL27、SCC-15均购自美国模式培养物保藏所(American Type Culture Collection,ATCC)。

    DMEM培养基、SYBR Green Ⅰ实时定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测试剂盒(TOYOBO公司,日本),Trizol 试剂盒(TaKaRa公司,日本),Trans-well小室(BD公司,美国),MTT试剂盒(上海碧云天生物技术有限公司) ......

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