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编号:642922
性别决定区Y框蛋白9诱导人口腔鳞状细胞癌CAL27微管形成和上皮间质转化的机制初探
http://www.100md.com 2021年2月26日 华西口腔医学杂志 2021年第1期
荧光素酶,1材料和方法,1试剂和仪器,2细胞培养,3方法,4统计学方法,2结果,1干扰SOX9抑制SOX9的表达,2干扰SOX9抑制微管形成,3干扰SOX9对上皮间质形态的影响
     黄盛 张七援 何爱娥 李洪波 张智星

    1.武汉理工大学马房山校区东院医院口腔科,武汉430000;2.武汉大学口腔医院牙体牙髓二科,武汉430000;3.武汉市第五医院口腔科,武汉430000;4.武汉大学口腔医院修复科,武汉430000;5.同济医科大学附属医院口腔科,武汉430000

    口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)是全球范围内最广泛发生的癌症之一,约占头颈部肿瘤的38%和所有口腔恶性肿瘤的90%以上[1]。早期患者的5 年生存率为55%~60%,而晚期患者的5 年生存率降至30%~40%[2]。随着诊疗技术的不断提高,OSCC的存活率有所提高,但在癌症治疗中仍存在非特异性、非选择性和毒性的巨大挑战。在接受手术、放疗和/或化疗后,大多数患者会遭受局部缺陷、畸形、功能障碍、耐药性以及其他无法忍受的毒性和不良反应。OSCC复发率高,并且易于转移,导致患者生活质量下降[3]。因此,OSCC 需要更好的治疗,靶向治疗可能会作为治疗的辅助手段提供最佳选择[4]。性别决定区Y 框蛋白9 (sex determining region Ybox 9,SOX9)是一个SOX 家族转录因子的成员,在各种组织的发育和分化中起关键作用[5]。最近,SOX9 被证明参与了各种类型癌症的发生或发展,包括前列腺癌[6]、乳腺癌[7]和肾细胞癌[8]、皮肤基底细胞癌[9]和食管癌[10]。然而,SOX9的表达对OSCC的作用机制仍不清楚。因此,本研究探索SOX9对人OSCC 细胞CAL27 微管形成和上皮间质转化的影响及其作用机制,以期为OSCC的靶向治疗提供实验依据。

    1 材料和方法

    1.1 试剂和仪器

    DMEM 培养液、胎牛血清、胰酶(Invitrogen公司,美国);二喹啉甲酸(bicinchoninic acid,BCA)蛋白定量试剂盒(PIERCE 公司,美国);MatrigelTM底膜基质(BD 公司,美国);波形蛋白(Vimentin)、钙黏蛋白(E-cadherin)、神经钙黏素(N-cadherin)、纤连蛋白(Fibronectin)、Wnt、β-连环蛋白(β-catenin)和T 细胞4(T-cell factor-4,TCF-4)抗体、HRP标记的山羊抗兔二抗(NEB公司,美国);高速低温离心机(Beckman 公司,美国);CO2培养箱(Thermo 公司,美国);电泳槽、电转仪(Bio-Rad 公司,美国);倒置相差显微镜(TS100)(Nicon 公司 ......

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