牟婷琛 冯剑颖

    1.台州市中心医院(台州学院附属医院)口腔科，台州318000；2.浙江中医药大学口腔医学院，杭州310053

    关节软骨缺乏血管和神经营养，自我修复能力不足，如受到损伤时骨髓间充质干细胞难以自发补充至损伤区域，形成修复性软骨[1]，往往为纤维瘢痕组织所替代，影响关节的正常生理结构和功能，长期的病理刺激最终可导致骨关节炎(osteoarthritis，OA)等组织退行性疾病的发生[2]。因此，阻止早期软骨损伤的进一步发展，启动软骨修复机制是目前研究的热点。随着组织工程、干细胞治疗技术的发展，软骨干细胞的发现和研究为从不同角度治疗软骨病变提供了新思路。

    正常关节软骨分为4 层，包括表层、中间层、深层以及由潮带分开的钙化软骨层，不同区域有不同的生物学基质成分和细胞表型[3]。关节软骨含有大量的干细胞或祖细胞，软骨干细胞来源于关节软骨表层。Dowthwaite等[4]研究发现，牛关节软骨表层细胞有更高的Notch-1 表达阳性率，提示关节软骨表层存在软骨干细胞。Pretzel等[5]发现，CD166+细胞几乎只存在关节表层和中间层。Barbero等[6]对关节表层细胞进行筛选后再培养，可以获得具有多向分化能力、增殖能力的细胞，该细胞具有多种干细胞表面标志物的表达。软骨干细胞可以在自我更新、多向分化和迁移能力的基础上进行体外分离和鉴定[7]，然而没有单一、特异的细胞标记物可以在体内对其进行示踪或区分[3]。由于缺乏稳定的标记来源，人类软骨干细胞的发育起源尚未明确，但是仍有证据表明软骨细胞中至少有2个不同的亚群在软骨发育中共存，软骨干细胞(cartilage stem cells，CSCs) 和 软 骨 祖 细 胞(cartilage progenitor cells，CPCs)。由于干细胞和祖细胞本质很难区分[8]，因此本文统一采用干细胞来表示。

    1 软骨干细胞的标记鉴定

    干细胞的标记及示踪是开展干细胞研究的前提，通过示踪不仅可以直观了解其分布，而且可以追踪体内的分化转归和调控机制。目前对软骨干细胞标记的研究还停留在寻找与骨髓间充质干细胞标记物共性和特异性的对比中和参考细胞治疗国际协会制定的间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)的鉴定标准，即：贴壁性，特定细胞表面标记物的表达，成脂、成骨、成软骨的能力[9]。

    1.1 CD家族

    细胞治疗国际协会认为满足以下条件可考虑为MSCs：细胞表面标记物CD73/CD90/CD105表达阳性 ......