低能量激光照射对脂多糖介导人牙周膜成纤维细胞炎性损伤的保护作用
牙周炎,试剂盒,1材料和方法,1材料和仪器,2方法,3统计学分析,2结果,1hPDLFs细胞培养,2细胞存活率及细胞内Ca2+浓度,3Hoechst染色凋亡率检测,4细胞上清液中炎性因子含量,5M
靳晓兰 张亚男 孙成蕊 邹朝晖1.天津市津南医院口腔科,天津300350;2.天津中医药大学第一附属医院口腔科,天津300192;3.天津医科大学口腔医院牙体牙髓科三室,天津300070
牙周炎为慢性破坏性疾病,长期慢性炎性因子浸润导致牙周膜细胞的损伤和凋亡,使得牙周胶原纤维破坏,严重的炎症反应会造成不可逆的牙周损伤导致牙龈萎缩甚至是牙龈坏死。研究[1-2]显示人牙周膜成纤维细胞(human periodontal liga‐ment fibroblasts,hPDLFs)在牙周炎受损、牙周组织功能维持和修复中发挥着极其重要的作用,有效阻断牙周炎过程中hPDLFs 的损伤对促进牙周组织修复有着重要意义。低能量激光照射(low-lev‐el laser irradiation,LLLI)指的是输出功率在500 mW内,能量密度范围0.04~50 J·cm-2,波长范围600~1 100 nm的近红外或红色光激光[3]。LLLI是近年来临床上常用的理疗方法,其在治疗神经性和糖尿病溃疡疾病方面以及促进骨组织和软组织的愈合方面均有较好的作用,其在治疗牙周疾病及牙周炎方面亦有显著疗效[4-6]。目前有报道[7]显示LLLT可能通过调节腺苷-3’,5’-环化一磷酸(cyclic ade‐nosine monophosphate, cAMP) /核 转 录 因 子 -κB(nuclear transcription factor kappa B,NF-κB)抑制脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人牙周膜细胞炎症反应,但是关于LLLI 对hPDLFs 炎性损伤的影响和作用有待进一步研究,本研究拟探讨LLLI对LPS介导hPDLFs炎性损伤的影响及机制。
1 材料和方法
1.1 材料和仪器
hPDLFs(上海中乔新舟生物科技有限公司,货号:2630)。HRP 标记的山羊抗兔多克隆抗体、HRP 标记的山羊抗兔多克隆抗体、大肠埃希菌(Escherichia coli,E.coli) LPS、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2、MMP-3、MMP-9、磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde phosphate dehydrogenase,GAPDH)单克隆抗体(Sigma公司,美国),白细胞介素(interleukin,IL)-8酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒、IL-6 ELISA试剂盒、肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-α ......
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