肖勉 胡智慧 江恒华 房维 龙星

    武汉大学口腔医院口腔颌面创伤与颞下颌关节外科，湖北省口腔基础医学重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地，口腔生物医学教育部重点实验室(武汉大学)，武汉430000

    颞下颌关节骨关节炎(temporomandibular joint osteoarthritis，TMJOA)是临床常见的困扰患者的一种疾病，是颞下颌关节紊乱病(temporomandibular joint disorder，TMD)中的主要疾病之一，患者大多表现为疼痛以及关节功能障碍，极大地影响了患者的生活质量[1]。在影像学上，绝大多数TMJOA患者往往显示有明显的髁突骨质吸收和破坏，部分患者经过治疗后显示骨质破坏后的重建。骨质的破坏及改建需要破骨细胞的参与，目前为止破骨细胞在TMJOA中的作用并不清楚。

    近年来许多研究表明，TMJOA的发生发展过程中伴随着破骨细胞活性及功能的改变。通过机械性超负荷建立的TMJOA大鼠模型中，缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factor，HIF)-1α被激活，抑制骨保护素(osteoprotegerin，OPG)的表达，导致破骨细胞的分化及数量增多[2]。在实验性单侧前牙咬合构建的小鼠TMJOA模型中也发现了软骨下小梁骨的丢失，破骨细胞活性增强[3]。研究[4]发现，软骨下骨的病理改变在TMJOA中至关重要，通过使用瑞巴派特抑制破骨细胞活性和分化可以减少软骨下骨丢失，从而减轻TMJOA的髁突变性。也有研究[5]表明，使用炎性抑制剂白细胞介素(interleukin，IL)-37b可以抑制破骨细胞形成，有可能成为预防TMJOA的新靶点。本研究通过碘乙酸钠(monosodium iodoacetate，MIA)建立TMJOA模型，应用抗酒石酸酸性磷酸酶染色(tartrate resistant acid phosphatase，TRAP)观察TMJOA关节组织中破骨细胞的存在情况，同时在临床上收集TMJOA患者滑液，对破骨细胞进行刺激，进一步证实破骨细胞分化在TMJOA的发生中的作用。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    RAW264.7细胞系(美国模式培养物集存库，美国)，MIA、TRAP试剂盒(西格玛奥德里奇公司公司，美国)、苏木素伊红(hematoxylin and eosin，HE)(武汉谷歌生物科技有限公司)、高糖杜尔伯科改良伊格尔培养基(Dulbecco's modified eagle medium，DMEM)、胎牛血清(fetal bovine serum ......