唐楠 张雨垚 程珏华 赵知白 范媛

    南京医科大学附属口腔医院口腔黏膜病科，江苏省口腔疾病研究重点实验室，江苏省口腔转化医学工程研究中心，南京210029

    口腔扁平苔藓(oral lichen planus，OLP)是一种慢性炎症性口腔黏膜病，其病理特征是固有层密集淋巴细胞呈带状浸润，基底层液化变性[1-3]。OLP是一种T淋巴细胞介导的局部自身免疫性疾病[4]，虽然病因尚不清，但细胞免疫因素在发病机制中起着关键作用[5]。目前明确趋化因子与趋化因子受体结合可以调节抗原提呈、细胞因子产生以及效应T细胞和记忆T细胞的分化[6]，且二者在正常组织和炎症组织中决定免疫细胞和炎性介质转运方面存在差异表达[4]。

    CXC亚家族趋化因子受体(CXC chemokine receptor，CXCR)3可与CXC亚家族趋化因子配体(CXCchemokine ligand，CXCL)9/10/11结合，介导辅助性T细胞(helper T cell，Th)1型疾病的发生[7]，如自身免疫性疾病[8]、超敏反应及界面皮炎等[7,9]。CC亚家族趋化因子受体(CC chemokine receptor，CCR)4是CC亚家族趋化因子配体(CC chemokine ligand，CCL)17和22的受体，主要调节Th2细胞相关的免疫过程如多发性硬化症(multiplesclerosis，MS)[10]。课题组[11-12]前期对CXCL10-CXCR3、CCL17-CCR4两个轴分别进行了研究，发现在OLP中两轴相关受体/配体均存在异常表达，但两轴间的相关互作关系尚不明确。故本研究通过收集OLP及健康者外周血对T淋巴细胞交叉干扰，检测两轴相关受体/配体的表达水平，进一步探讨两轴间的相互关系，从而为进一步阐明趋化因子及受体在OLP发病机制中的网络调控作用提供实验依据。

    1 材料和方法

    1.1 主要材料及试剂

    磁珠、流式管、流式细胞检测仪(BD公司，美国)，淋巴细胞分离液、EasySepTM人CD3阳性细胞分选试剂盒(Stemcell公司，加拿大)，磷酸盐缓冲液(phosphate buffer saline，PBS)、RPMI 1640培养基、青霉素-链霉素双抗、胎牛血清(fetal bovine serum，FBS)(Gibco公司，美国)，CXCR3(MCE公司，美国)，CCR4拮抗剂(RD公司，美国)，PE荧光标记的抗人CD3抗体、异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate ......