周婷 周雪 宋斌

    贵州省人民医院口腔科，贵阳550002

    牙周炎是发生在牙周支持组织的慢性炎症性疾病，是成年人失牙的最主要原因[1]。第四次全国口腔流行病学调查[2]结果显示，在35～44 岁的成年人中，缺失牙及全口失牙的比例分别是84.4% 和1.8%。此外，全球范围内患有重症牙周炎的患者有近8 亿，全口失牙的患者为2.67 亿[3]。因此，牙周炎已经成为威胁人类健康的重要口腔疾病。近年来大量研究[4-5]表明，全身健康状况对牙周炎的发生发展具有促进作用，其中糖尿病已被证实是牙周炎的重要危险因素。中国糖尿病的患病率为14.8%，大约1.1 亿成年人患有糖尿病，居世界首位，已成为威胁人民健康的重大慢性疾病[6-8]。因此深入探讨糖尿病促牙周炎发生发展的分子机制，对于进一步揭示牙周炎的发病机制以及对牙周炎的防治具有重大意义。

    细胞凋亡、细胞自噬作为目前研究较深入的程序性细胞死亡方式(programmed cell death，PCD)，已被证实参与糖尿病相关牙周炎的发生发展[9]。课题组的前期文献综述[10]发现，程序性细胞坏死为另一种新的PCD，参与调控牙周炎的发生发展；并有研究[11]表明，程序性细胞坏死也参与了糖尿病相关牙周炎的发生发展。受体相互作用蛋白1 (receptor interacting protein 1，RIP1) 是调控程序性细胞坏死的重要基因之一，能够调控细胞死亡及炎症反应[12-13]。研究表明，RIP1既参与了牙周炎的发生发展[14]，也能够调控糖尿病的发展进程[15]。课题组的前期细胞实验[16]也证实，高糖环境能够促进牙周组织中重要细胞——巨噬细胞发生炎症反应。程序性细胞坏死特异性抑制剂Necrostatin-1 (Nec-1) 能够通过下调RIP1的表达，减轻高糖环境对细胞的促炎作用[17-19]。Nec-1 作为RIP1的特异性抑制剂，除了能够抑制炎症反应外[20]，还能够抑制氧化应激反应[21-22]。由于氧化应激反应是糖尿病相关牙周炎的一个重要发病机制[23-25]。而糖尿病能否通过调控RIP1 的表达影响牙周组织的氧化应激反应，目前还未见相关报道。因此本文在前期研究基础上，继续采用细胞实验，对Nec-1能否减轻高糖环境对巨噬细胞氧化应激反应的促进作用及其分子机制进行探讨。

    1 材料和方法

    1.1 主要材料

    Nec-1 (MCE 公司，美国)，2’，7’-二氯荧光黄双乙酸盐荧光探针DCFA-DA、丙二醛(malondialdehyde ......