张秀娟 吴伟 陈欣 房芷纯 叶金香 欧晓艳

    南昌大学附属口腔医院·江西省口腔生物医学重点实验室，南昌330006

    牙周炎(periodontitis)是一种复杂的慢性炎症感染性疾病[1]。牙菌斑生物膜被认为是牙周炎发病的始动因子，主要毒力因子为牙龈卟啉单胞菌脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)[2]。在牙周炎的发生发展过程中，牙菌斑首先导致牙龈的炎症反应。细胞因子介导的宿主免疫反应在牙周组织的破坏和发展中发挥着重要的作用[3]。其最具代表性的促炎细胞因子是肿瘤坏死因子(tumor necro‐sis factor，TNF)-α、白介素(interleukin，IL)-1β及IL-6。而IL-4、IL-10为强有力的抗炎细胞因子。在众多的抗炎细胞因子中，转化生长因子(transforming growth factor，TGF)-β和IL-10是控制免疫反应的关键因素[4]。

    葡萄籽原花青素(grape seed proanthocyani‐dins，GSPs)是从葡萄籽中提取，属于多酚类物质，具有很强的生物活性，能清除自由基，是天然的抗氧化剂，同时还具有较低的毒性[5-6]。GSPs广泛应用于食品、医药、化妆品等领域。在预防或减缓疾病发生的同时，还能提高机体免疫力，预防心血管疾病，在糖尿病[7-8]和全身炎症性疾病等领域的应用已有报道[9-10]。

    本课题组前期通过检测GSPs对牙龈卟啉单胞菌的最低抑菌浓度并采用鲎试验测定GSPs对牙龈卟啉单胞菌产生LPS及生物膜的影响，发现GSPs对牙周致病菌分泌的内毒素有抑制作用，同时对生物膜有破坏作用[11-12]；后期采用结扎大鼠第一磨牙并给予LPS刺激建立牙周炎模型，通过机械治疗联合GSPs的对照研究发现GSPs有助于改善牙周组织炎症及牙槽骨吸收程度、促进牙槽骨改建[13]。本研究假设GSPs对牙龈上皮细胞炎症有预防作用并从促炎细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6和抗炎细胞因子IL-4、IL-10及TGF-β入手，研究GSPs对炎症反应中细胞因子表达的影响以进一步揭示GSPs预防牙周炎的作用机制。

    1 材料和方法

    1.1 药品和试剂

    人牙龈上皮细胞(human gingival epithelial cells ......