马玉莹芦昕张利娟刘育含李帆谭凯璇张颖李修珍杨芳

    1.青岛市市立医院口腔医学中心，青岛266071；2.大连医科大学口腔医学院，大连116044；3.临沂市妇幼保健院口腔科，临沂276002；4.青岛大学口腔医学院，青岛266000；5.天津医科大学口腔医学院，天津300070

    根管治疗是牙髓炎和根尖周炎最有效、最常规的治疗方法，而根管治疗的成功与否取决于根管内的感染物能否彻底清除以及根管内感染能否得到控制。其中，粪肠球菌被认为是与根管感染相关的主要病原体[1]，有效抑制粪肠球菌在根管治疗的成功中就显得尤为重要。

    尽管根管机械预备技术已相当成熟，但仍有至少35%～50%的根管壁难以被器械预备[2]，无法达到彻底清除根管系统内感染物质的目的，还需辅以冲洗液的机械或化学作用来达到。次氯酸钠是临床常用根管冲洗液，有良好的组织溶解能力和抗菌能力[3]，其常用质量分数为0.5%～5.25%。

    目前评价药物对病原微生物作用效果的“金标准”是通过最小抑制浓度(minimum inhibitory con‐centration，MIC)对目标药物进行定量评价[4]。传统药物评价技术主要作用于细胞群体水平，忽略了细胞异质性，而药物作用下产生的细胞异质性则是致病菌产生耐药的基础。病原菌的异质性水平必须降低到一定水平才能保证抗菌剂良好的作用效果。最小抑菌浓度的测定仅能考察微生物生长抑制效果，而未考虑细胞活性，忽略了不生长但具有代谢活性(nongrowing but metabolically active，NGMA)的持留菌群体。细胞异质性和细胞代谢活性的存在正是导致耐药性及疾病复发的重要因素[5]。

    重水拉曼技术是一种不依赖细胞培养的、在单细胞水平上，快速、定量、无损、高通量的评价抗菌剂对目标微生物的代谢抑制效果的技术手段，并已应用于临床药物评价筛选、微生物种类鉴别[6]等领域。Tao等[7]采用重水拉曼技术在单细胞水平表征不同口腔抑菌剂对变异链球菌UA159、血链球菌ATCC10556等多种细菌代谢活性的影响，证实了拉曼光谱中的重水峰[(C-D峰)2 040～2 300 cm-1区域]是细胞生理代谢活性的生物学指示标志，其所占比例可用于分析药物刺激目标菌株后的代谢反应；并提出最低抑制代谢浓度(mini‐mum inhibitory concentration based on metabolic ac‐tivity，MIC-MA)[使目标菌株在药物作用8 h后的ΔC-D-ratio(当前时间与0 h的C-D ratio(重水峰所占面积)差值)均值≤0且标准差≤0.005的最小药物浓度]评价抗菌剂对目标菌种的代谢抑制作用 ......