张雨薇 何雨轩 丁一 刘程程

    口腔疾病研究国家重点实验室 国家口腔疾病临床医学研究中心四川大学华西口腔医院牙周病科，成都610041

    口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcino‐ma，OSCC)约占口腔癌的90%[1]。吸烟、酒精和病毒感染(如人乳头瘤病毒)是OSCC的独立危险因素[2-3]，但仍有15%的病例病因不明[4]。近年来，牙周致病菌被认定为OSCC的一个独立危险因素[3]。牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis，P.gingivalis)是牙周关键致病菌。Katz等[5]研究发现，P.gingivalis在口腔鳞状细胞癌组织中的检出量显著高于正常牙龈组织。P.gingivalis能够促进牙龈上皮细胞增殖，抑制凋亡，并诱导上皮—间充质转化，促进肿瘤的发生、发展[6]。细胞增殖是细胞通过分裂，使细胞数目增多，并将遗传信息传给子代细胞，细胞过度增殖则会导致恶性肿瘤。因此，探究P.gingivalis促进牙龈上皮细胞增殖的机制具有重要意义。

    钙结合蛋白1(calbindin 1，CALB1)和钙结合蛋白2(calbindin 2，CALB2)同是EF-手型家族的钙结合蛋白[7]。CALB1在谷氨酸受体激活后可调节钙离子内流，在正常骨细胞、成骨细胞和多巴胺能神经元[8-10]以及骨肉瘤细胞U2OS、非小细胞肺癌细胞和卵巢癌细胞等肿瘤细胞[11-13]中抑制多种促凋亡信号通路诱导的细胞凋亡。半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)是细胞凋亡过程中最主要的终末剪切酶，在细胞凋亡中起着不可替代的作用，常用于测定细胞凋亡[14]。CALB1能够调节肿瘤抑制蛋白p53。在卵巢癌细胞中，CALB1可作用MDM2，促进p53与MDM2的相互作用，导致p53蛋白降解[12]。p53蛋白水平及其转录活性受到MDM2调控，而MDM2的基因表达受到p53调控，形成负反馈通路[15]。目前P.gingivalis对CALB1表达的影响尚无报道。CALB2首次在视网膜中被发现，由视网膜神经节细胞亚群、暗斑和水平细胞表达[16]。CALB2在皮肤表皮细胞和皮肤腺上皮表达，并受到甲状腺激素紊乱的显著影响[17]。成人Malassez上皮亚群中也有表达，是成釉细胞瘤上皮、子宫内膜间质细胞和间皮细胞标志物[18-21]。本研究用CA9-22细胞体外模拟牙龈上皮细胞，探究P.gingivalis感染对CA9-22中CALB1表达的影响，以及CALB1在P.gingivalis影响细胞增殖和细胞凋亡中的作用 ......