戴振宁 郑蔚晗 利时雨，

    1.广东省第二中医院口腔科，广州 510095；2.南方医科大学第三附属医院，广东省医学3D打印应用转化创新平台，广州510630

    慢性牙周炎(chronic periodontitis，CP)是常见的口腔疾病，通常由牙菌斑生物膜作为始动因子，造成牙周组织的破坏，牙周炎晚期牙齿周围软组织和骨组织严重破坏吸收，引起牙齿的松动和脱落[1]。在生理状态下，由成骨细胞介导的骨基质分泌，与由破骨细胞介导的骨基质分解，往往处于动态平衡；而在病理性骨吸收状态下，主要表现为破骨细胞的过度激活[2-3]。以往研究[4-6]显示，在细菌引起的炎性环境中，牙周组织细胞和免疫细胞对炎性因子产生应答，如M1型巨噬细胞加速牙周炎病程，CD4+T 细胞通过分泌白细胞介素(interleukin，IL)-2、肿瘤坏死因子α(tumor ne‐crosis factor-α，TNF-α)激活破骨细胞导致牙槽骨吸收，B 淋巴细胞通过分泌核因子κB 受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor-κB li‐gand，RANKL)诱导破骨细胞进行骨吸收等。然而，对于牙周组织中的牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells，PDLSCs)在CP 的病理性骨吸收中扮演何种角色，目前缺乏相关研究。

    干细胞可通过旁分泌机制调控细胞本身和周围细胞的生物学功能，外泌体(exosomes，Exo)是干细胞进行细胞间通讯、信号转导的重要媒介[7]。Exo是一种由细胞分泌的微小的细胞外囊泡，粒径通常在30～150 nm，其中含有丰富的蛋白、核酸、脂质等物质[8]。在不同的生理、病理环境下，Exo中的成分会随来源细胞蛋白、核酸表达谱改变而发生同步变化[9]。因此，CP 病程中，炎性牙周膜干细胞(PDLSCs-CP)可能经其分泌的Exo，实现抑制骨形成或促进骨吸收的功能。

    本研究提取了健康牙周膜组织、炎性牙周膜组织中PDLSCs 的Exo，通过对Exo 蛋白组分的分析，初步研究PDLSCs-CP 中Exo 对RAW264.7 破骨细胞分化的影响，为CP 的病理性骨吸收发展机制提供新的视角。

    1 材料和方法

    1.1 细胞株、试剂、仪器

    1.1.1 细胞株 细胞原代提取已获患者知情同意，本研究实验已通过医院伦理委员会审核批准。正常表型PDLSCs(PDLSCs-WT)来源于3例正畸治疗前拔除的健康牙的牙周膜组织，病例纳入标准：牙周健康、因正畸需要拔牙 ......