李文健 童磊 王奇民 韩红钰 陈正岗

    1.青岛大学附属青岛市市立医院口腔医学中心，青岛 266071；2.大连医科大学口腔医学院，大连116044

    涎腺腺样囊性癌(salivary adenoid cystic carci‐noma，SACC)是常见的上皮源性恶性肿瘤，约占涎腺恶性肿瘤的30%，具有早期血行播散，肺转移率高以及嗜神经生长等特点[1]，5 年生存率为70%～90%，但在发生远处转移的病例中，5年生存率骤降至20%左右[2]。因此，阐明影响SACC 侵袭迁移的可能机制对其临床治疗有重要意义。

    RAS 家族基因包括HRAS、KRAS、NRAS，其编码合成的RAS 蛋白作为三磷酸鸟苷(guano‐sine triphosphate，GTP)结合蛋白家族中的一员，能够调控细胞的生长发育，同时其异常激活可影响包括PI3K/蛋白激酶B(protein kinase B，AKT)在内的多种下游信号通路，促进人类恶性肿瘤的发生发展[3-4]。法尼基转移酶(farnesyltransferase，FTase)属于异戊二烯基转移酶家族，能够识别RAS 蛋白C 端CAAX 序列，使法尼基团转移到半胱氨酸的残基上，从而完成异戊二烯化修饰，此为RAS 蛋白与细胞膜稳定结合，参与调控恶性肿瘤细胞各种生物学行为的必要条件[5-7]。RAS 家族蛋白均能在稳定状态下进行异戊二烯化，其中KRAS、NRAS 都能被其他异戊二烯基转移酶识别，仅有HRAS 只能被FTase 识别修饰后发挥作用[8]，因此在FTase 功能被抑制时，HRAS 蛋白的异戊二烯化就无法正常进行，导致其不能精准定位于细胞膜上，致癌能力减弱[9]。研究[10-12]证明，抑制FTase 活性可对多类HRAS 高表达的恶性肿瘤进展产生较大影响，但对SACC的影响及相关机制尚未明确。

    侵袭与迁移一般出现于恶性肿瘤发展的中后期，是影响恶性肿瘤预后的关键生物学行为。研究证实上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition，EMT)可以使肿瘤细胞获得部分间质细胞表型，从而增强其迁移侵袭能力，是调控包括SACC 在内的多种恶性肿瘤迁移侵袭的关键机制。本研究使用小干扰RNA(small interfering RNA，siRNA)干扰技术于体外沉默FTase，检测其对人SACC 细胞SACC-LM、SACC-83 侵袭迁移及EMT 的影响，探讨其作用机制，以期为临床靶向治疗药物发展提供参考。

    1 材料和方法

    1.1 主要材料和试剂 ......