大鼠三叉神经痛模型中小胶质细胞激活情况及经时变化
1材料和方法,1实验动物及分组,2眶下神经部分结扎动物模型的建立,3体重变化测量,4行为学变化观察,5机械痛阈测试,6实验动物取材,7免疫组织化学染色,8统计分析,2结果,1大鼠体重变化,2行为学变化,3机械痛
卢妍竹 张婧琦 赖文莉口腔疾病研究国家重点实验室 国家口腔疾病临床医学研究中心四川大学华西口腔医院正畸科,成都 610041
三叉神经痛是在三叉神经分布区域内突然发作的、持续数秒至数分钟的剧烈疼痛,其发作具有周期性、阵发性等特点,发作间歇无症状[1-2]。疼痛由三叉神经末梢以神经冲动的形式传递至三叉神经节,之后进一步传递至延髓的三叉神经核复合体,通过丘脑经由众多脑区调节后传递至大脑皮层而被感知[3]。疼痛发作时,传入三叉神经核的痛觉信息主要由三叉神经脊束核尾侧亚核(spi‐nal trigeminal nucleus caudal part,Sp5C) 处 理[4],该区小胶质细胞可能出现激活。小胶质细胞是神经系统内固有的重要免疫细胞,对外界刺激反应灵敏,激活后形态发生明显变化以获得更强的吞噬及运动能力,且可以进一步释放促炎因子参与疼痛的发生和维持[5]。周围神经损伤引起的炎性反应以及脊髓背角神经元的过度兴奋性,均为小胶质细胞激活的促进因素[6]。小胶质细胞的激活在神经病理性疼痛中起着关键作用,具体机制仍有待进一步研究[6]。
本研究的目的是通过经口内开口结扎大鼠三叉神经的眶下神经(infraorbital nerve,IoN)分支,引起三叉神经慢性压迫性损伤(chronic con‐striction injury,CCI),构建大鼠三叉神经痛动物模型(IoN-CCI)后,探索Sp5C中小胶质细胞激活情况及其随时间的变化,同时研究该变化与大鼠颌面部的疼痛是否具有一致性,以期为进一步探索三叉神经痛发病机制提供思路。
1 材料和方法
1.1 实验动物及分组
本实验自四川大学动物实验中心购买8~10周龄的雄性Sprague-Dawley大鼠,体重230 g±20 g,无疾患。大鼠在室内温度25℃±2℃的空调房内饲养,食物及水源充足。所有大鼠均符合国际动物实验要求,在正常昼夜节律下饲养3 d,待适应环境后进入实验。
本实验共使用了48只大鼠,随机抽取8只作为空白对照组,再随机将剩余40只分为IoN-CCI组及假手术组(各20只),2组中各8只用于行为学观察、机械痛阈测试及体重测量,至第30天处死取材,其余12只分别在术后第1、5、10、15天处死取材。
1.2 眶下神经部分结扎动物模型的建立
按照体重50 mg·kg-1体重的剂量经由腹腔注射1%戊巴比妥钠溶液麻醉大鼠,将大鼠仰面固定在手术台上,使用开口器打开大鼠上下颌,碘伏消毒后 ......
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