吴洁 崔占琴 韩瑜 李文静

    1.河北医科大学第二医院口腔正畸科，石家庄 050000；2.石家庄市人民医院口腔科，石家庄 050011；3.河北医科大学第二医院口腔内科，石家庄 050000

    近年来，随着人们面部审美观念及口腔健康意识的增强，成人正畸矫治比例逐年增加。但临床工作中发现，相同时间相同牵引力下大龄患者正畸过程牙移动速度较年轻患者慢，导致临床医生实施成人矫治难度增大，患者就诊周期延长。

    骨保护素(osteoprotegerin，OPG)/核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear fac‐tor-κB ligand，RANKL) /核因子-κB 受体活化因子(receptor activator of nuclear factor-κB，RANK) 系统是正畸过程中重要的破骨通路[1-2]。人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells，HPDLCs) 是参与正畸骨改建的主要效应细胞[3]。HPDLCs 表达OPG、RANKL 因子[4-5]。OPG/RANKL 的比值可提示骨吸收过程的状态，比值减小时骨吸收加快；比值增大时骨吸收被抑制[6]。增龄变化是指生物体的细胞、器官随着年龄的增长发生结构退化、功能下降的一种现象[7]。本实验即通过观察不同年龄组人群HPDLCs 在体外持续静压力刺激下OPG、RANKL 的表达，探索增龄因素通过OPG/RANKL/RANK 通路对正畸压力侧骨改建产生影响的作用机制，以期为临床不同年龄段患者的正畸治疗提供理论参考。

    1 材料和方法

    1.1 主要试剂

    DMEM 培养基(GIBCO 公司，美国)，青霉素/链霉素溶液(上海碧云天生物科技有限公司)，胎牛血清(PAN 公司，德国)，0.25%胰蛋白酶、PBS(BI公司，以色列)，CK19(杭州华安生物技术有限公司)，通用型SP试剂盒(上海中杉金桥生物技术有限公司)，β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色试剂盒(上海碧云天生物科技有限公司)，CCK-8 试剂盒(Biosharp，合肥兰杰柯国际贸易有限公司)，人OPG 酶联免疫吸附试验(enzymelinked immunosorbent assay，ELISA)试剂盒(杭州联科生物技术股份有限公司)，人RANKL ELI‐SA 试剂盒(武汉爱博泰克生物技术有限公司)。

    1.2 HPDLCs原代培养及鉴定

    取自河北医科大学第二医院口腔颌面外科门诊收集因治疗需要拔除的健康离体牙 ......