赵洁，杨彩华，胡明，刘中秋(南方医科大学药学院药剂系，广州市510515)

    人参皂苷Rb3为五加科人参属植物的主要活性成分之一，在缺血时可通过抑制神经元持续性钠电流的增加幅度发挥对缺血性神经元的保护作用[1]，具有良好的抗脑缺血、抗血栓以及保护神经细胞作用[2]。对于人参皂苷Rb3含量的测定，目前多采用高效液相色谱-紫外分光光度(HPLC-UV)及高效液相色谱-蒸发光散射(HPLC-ELSD)检测法[3]。但这些方法受灵敏度及线性范围的限制，很难准确定量药物浓度较低的细胞样品。笔者建立了检测细胞样品中人参皂苷Rb3的液相色谱串联质谱电喷雾(LC-MS/MS)法，并研究了人参皂苷Rb3在Caco-2单细胞层模型上的吸收特征，这在国内尚未见文献报道。

    1 材料

    1.1 仪器

    6410型液-质联用串联四极杆质谱仪(美国Agilent公司)，包括Agilent 1200型高分离快速液相色谱、ESI电喷雾离子源、三重四极杆质量分析器；Gradient A10型超纯水系统、Millicell-ERS型跨膜电阻仪(美国Millipore公司)；Forma SeriesⅡ型CO2培养箱(美国Thermo electron公司)；TS100-F型倒置显微镜(日本Nikon公司)；Eppendorf 5810R型低温高速离心机(德国Eppendorf公司)；MS 3D型涡旋混匀器(德国IKA公司)；插入式细胞培养仪(丹麦Nunc公司)。

    1.2 试药

    DMEM高糖培养基、胰蛋白(EDTA，美国Gibco公司)；胎牛血清非必需氨基酸(NEAA，美国Hyclone公司)；谷氨酰胺、青-链霉素双抗溶液、Hank’s液(HBSS，美国Sigma公司)；鼠尾胶原(美国BD公司)；人参皂苷Rb3、人参皂苷Rg2(吉林大学化学学院，纯度均≥98%)；乙腈、甲酸铵均为色谱纯，水为超纯水，其余试剂均为分析纯。

    1.3 细胞株

    细胞Caco-2 TC7细胞株 ......