乙型肝炎免疫球蛋白聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒的体外跨膜转运试验Δ
渗透率,孵育,1材料,1仪器,2试药,3细胞株及培养,2方法,1细胞毒性试验,2HBIG及HBIG-PBCA-NP体外跨膜转运作用研究5,3统计学分析,3结果,1细胞毒性试验结果,2HBIG及HB
彭忠田,谭德明,黄顺玲,朱平安,3,刘菲(.中南大学湘雅医院,长沙市 40008;2.南华大学附属第一医院,衡阳市 4200;3.深圳市第七人民医院,深圳市 5808)乙型肝炎免疫球蛋白(Hepatitis B immunoglobulin,HBIG)是针对乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)的特异性被动免疫制剂,其治疗作用机制被认为是与血循环中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)特异性结合及中和HBV。而最近有研究[1~3]报道HBIG在体外细胞模型中能减少HBV的分泌或干扰包含HBV DNA中间体的核衣壳的包封。但慢性乙型肝炎患者体内HBsAg含量丰富,一般剂量的HBIG很快与循环中的HB-sAg结合,真正能进入肝实质细胞的量不足以抑制HBV,使HBIG的不能发挥应有的疗效。纳米粒是一种新型的药物载体,药物可通过溶解、包裹或吸附作用与纳米粒结合。已有研究表明,药物与纳米粒结合后,跨膜转运能力提高且药效增强[4~6]。本研究选用人正常肝细胞株QSG7701细胞为体外细胞模型,对HBIG聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒(Hepatitis B Immunoglobulin Polybutylcyano-Acrylate Nanoparticle,HBIGPBCA-NP)的细胞渗透情况进行研究,以探讨药物经纳米化是否会提高HBIG的细胞渗透率,使进入细胞内HBIG的浓度增加。
1 材料
1.1 仪器
全自动紫外分光光度计(美国Beckman公司);iCycler荧光实时聚合酶链反应(PCR)仪(美国BIO-RAD公司);ANYTEST 2000时间分辨荧光测定仪(上海新波生物技术有限公司);超净工作台(苏州安泰空气技术有限公司);恒温CO2培养箱(美国Quene公司);IX70倒置显微镜(日本Olympus公司)。
1.2 试药
HBIG注射剂(四川远大蜀阳药业有限公司,批号:20050704,规格:100 IU·mL-1);HBIG-PBCA-NP(中南大学湘雅医院传染病研究所,批号:200508 ......
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