邓守恒，李程，杨君君，邱美红，吴松松，陈萍(1.郧阳医学院附属人民医院，十堰市 44000；.郧阳医学院，十堰市 44000)

    硒化壳聚糖[1]是将壳聚糖与亚硒酸在酸性条件下，以混合金属离子为催化剂，通过拼合原理制备而成的一种有机硒，可有效克服无机硒不易被细胞吸收、活性和毒性范围较窄、致死量相对较小等缺点[2]，目前正对其抗肿瘤作用进行研究。硒和砷属同族，而砷(三氧化二砷)在临床上早已做为一种抗早幼粒白血病药物使用，故推导硒化壳聚糖可能也具有抗早幼粒白血病的作用，且毒副作用应该比无机硒和砷小得多。本试验即以人早幼粒白血病细胞株HL60为靶细胞，观察硒化壳聚糖对其产生的诱导分化作用并探讨了可能的作用机制，为硒化壳聚糖用于治疗人早幼粒白血病奠定基础。

    1 材料

    1.1 试药

    硒化壳聚糖(由福建医科大学药化系合成，经中科院福建物质结构所检测，批号：100601-200518，含硒量：0.4%)；佛波酯(TPA)、硝基蓝四氮唑(NBT)、二甲基亚砜(DMSO)均为美国Sigma公司产品；鼠抗人c-myc单抗、羊抗鼠异硫氰酸盐FITC-IgG二抗，兔抗人c-fos多抗、羊抗兔异硫氰酸盐FITC-IgG二抗均购自美国Santa Cruze公司。

    1.2 细胞

    人早幼粒细胞性白血病细胞株HL60细胞由福建省血液病研究所提供。

    1.3 仪器

    Epics Elite ESP型流式细胞仪(美国Coulter公司)。

    2 方法

    2.1 细胞培养

    取HL60细胞培养于含10%胎牛血清、100 IU·mL-1青霉素、100 IU·mL-1链霉素和2 IU·mL-1谷氨酰胺的RPMI 1640培养基内，于37℃、饱和湿度，5%CO2条件下培养，细胞接种24 h后即处于指数生长期。

    2.2 NBT还原法检测硒化壳聚糖对HL60细胞的诱导分化作用[3]

    取HL60细胞接种于24孔培养板中，每孔1 mL，接种浓度为每毫升2×105个 ......