姚金成，饶健，曾令贵#，张陆勇，江振洲，何玲，胡领，赵绪元(.湖南省药品审评认证与不良反应监测中心，长沙市 400；.中国药科大学国家新药筛选中心，南京市 0009；.中南大学湘雅二医院，长沙市 400)

    雷公藤是近半个世纪以来发生中毒事件最多的中草药之一，其毒性在传统中草药中排第三，全株均有不同程度的毒性。雷公藤属植物的化学成分非常复杂，迄今为止，已从雷公藤属植物中分离得到大约100种成分[1]，其中二萜类是主要毒性成分，其次是生物碱类[2]。雷公藤甲素(Triptolide，又称雷公藤内酯醇)是从雷公藤中提取的一种环氧二萜内酯醇，是雷公藤中主要药理活性及毒性成分[3]，其相关效价比雷公藤总苷高100～200倍[4]，是评价雷公藤药材质量好坏的主要指标，也是目前雷公藤制剂质量控制标准的主要指标。

    有较多的临床病例报道了雷公藤及其制剂所导致的肝毒性。本课题组的前期研究结果表明，较高剂量多次ig给予雷公藤甲素能导致大鼠较明显的肝毒性，那么这是否与影响肝药酶P450而导致其代谢减慢有关？鉴于目前尚未见有关雷公藤甲素对肝药酶P450影响的报道，故本研究拟探讨雷公藤甲素对肝药酶P450的影响，以期为临床安全、合理用药提供理论依据。

    1 材料

    1.1 仪器

    680型酶标仪、凝胶成像仪(美国Bio-Rad公司)；752C型紫外-可见分光光度计(上海第三分析仪器厂)；超速低温离心机(美国Beckman公司)；T25型组织分散器(美国IKA公司)；核酸电泳仪(北京市六一仪器厂)；BS210S型电子天平(德国Sartorius公司)。

    1.2 试药

    雷公藤甲素原料药(中国医学科学院皮肤病研究所，纯度>96%)；雷公藤甲素对照品(中国药品生物制品检定所，纯度>98%)；BCA蛋白浓度测定试剂盒(江苏碧云天生物技术研究所)；甲氧基异唑、乙氧基异唑、戊氧基异唑、牛血清白蛋白、Folin试剂、NADPH(美国Sigma公司)；红霉素(上海生工生物工程有限公司)；Anti-rabbit CYP3A，CYP2E1，β-actin ant-ibodies and HRP-conjugated goat anti-rabbit Ig(美国Santa Cruz公司)；硝酸纤维素膜(美国Pall公司)；丙烯酰胺、甲叉双丙烯酰胺(美国Roche公司)；甘氨酸(上海生工生物工程有限公司)；过硫酸胺(中国医药集团上海化学试剂公司)；鲁米诺发光底物试剂盒(美国Pierce公司)；其余试剂均为国产分析纯 ......