周洁，彭金良，徐宇虹#(.上海交通大学药学院分子药剂学实验室，上海市 200240；2.上海交通大学生命科学技术学院，上海市 200240)

    对于2型糖尿病病症，胰高血糖素受体(GCGR)与胰高血糖素之间的相互作用对于血糖调节具有重要意义。一方面，胰高血糖素可促进糖异生和糖原分解；另一方面，胰高血糖素可间接影响胰岛素分泌情况。因此通过抑制GCGR发挥作用可以缓解高血糖症状。有研究[1]发现GCGR的基因敲除后模型小鼠中血糖浓度明显降低，并且小鼠的糖耐量得到了很好的提高，这一发现也证实了GCGR在降糖中的重要地位。

    为了达到降糖的目的，需要有效的手段以抑制肝脏中GCGR的表达。近年来小分子药物GCGR拮抗药被报道具有很好的降糖稳定作用[2]；GCGR的反义抑制核苷酸也被证实能够有效地改善糖尿病模型小鼠的高血糖症状[3]。而近年来，siRNA类药被认为是一种更有效的抑制特定基因表达的药物，具有极大的应用前景[4]。基于此，在本研究中，笔者设计和研发了针对糖尿病小鼠模型GCGR的siRNA，考察了经高压快速静脉注射系统给药后，siRNA类药在缓解模型小鼠血糖症状中的作用情况。

    1 材料

    Milli-Q型纯水机(美国Millipore公司)；BS210S电子天平(德国Sartorius公司)；UV-21.2PC可见-紫外分光光度计(尤尼柯上海仪器有限公司)；pHS-2S型数显酸度计(上海天达仪器有限公司)；Centrifuge 5415R离心机(德国Eppendorf公司)；BCM-100生物洁净工作台(苏州净化设备有限公司)；DK-S24电热恒温水槽(上海精宏实验设备有限公司)。

    四氧嘧啶(Alloxan monohydrate，美国Sigma公司，色谱纯)；葡萄糖测定试剂盒(上海荣盛生物技术有限公司，批号：20030101)；靶向GCGR的3条长度为21 bp的siRNA双链序列(上海吉玛制药技术有限公司，色谱纯化单链冻干粉，纯度：>97%)；焦磷酸二乙酯(DEPC)处理除去RNA酶的磷酸盐缓冲溶液(PBS，自制)。

    健康昆明鼠，♂，6周龄，体质量30 g左右，由上海斯莱克试验动物责任有限公司提供(许可证号：SCXK(沪)-2007-0005)。于上海交通大学药学院实验动物中心20℃明暗交替环境中适应性预培养1周后进行实验 ......