赵倩，秦俭，郑维平，邱清艳

    (1.重庆医科大学附属第一医院心内科，重庆市 400016；2.重庆医科大学基础医学院病理生理教研室，重庆市 400016)

    2003年Zhao等[1]在狗缺血/再灌注研究中发现在心肌较长时间缺血后开始再灌注前对心脏进行3个短周期再灌、停灌处理(即30 s再灌-30 s再阻断)，即进行缺血后处理(IPC)，具有明显对抗心脏缺血/再灌注损伤的保护作用，其机制可能与IPC激活再灌注损伤补救酶(Reperfusion injury salvage kinase，RISK)中磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)、ERK信号通路有关。另有研究发现，重组促红细胞生成素[2]和蛋白激酶C-腺苷A2b受体激活剂[3]等多种药物亦具有类似IPC效应。本实验建立大鼠心肌缺血/再灌注(I/R)模型，应用PI3K/Akt特异抑制剂Wortmannin，探讨PI3K/Akt信号通路介导重组人促红细胞生成素(rhEPO)对IPC大鼠心脏功能的保护作用。

    1 材料

    1.1 试药

    重组人红细胞生成素注射液(商品名：益比奥，以下简称rhEPO，沈阳三生制药有限公司，批号：20090207V，规格：10000 IU·1.0 mL-1)；戊巴比妥钠(中国医药(集团)上海化学试剂公司，批号：F20030816，进口分装，含量：≥95%)；Wortmannin(以色列Fermentek公司，批号：W022，纯度：≥99%)。

    1.2 仪器

    DHG-30动物人工呼吸机(浙江医科大学医学实验仪器厂)；BL-410生物机能实验系统(泰盟科技公司)；心电图机(上海医疗仪器四厂)。

    1.3 动物

    ♂Sprague-Dawley(SD)大鼠42只，重庆医科大学实验动物中心提供(动物合格证号：SCXK(渝2007-0001))，体质量200～300 g。

    2 方法

    2.1 I/R模型制作

    将大鼠以3%戊巴比妥钠(25 mg·kg-1)腹腔注射麻醉后，仰卧位固定于鼠台上，以针状电极插入右前肢和左后肢皮下，连续监测标准Ⅱ导联心电图；气管插管，连接动物呼吸机进行人工通气(潮气量8～10 mL，呼吸频率60～70次·min-1)；分离右颈总动脉插入硅胶管，导管另一端通过压力传感器连接BL-410生物机能实验系统，然后缓慢插入导管至左心室，测定左室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)、左室内压最大上升速率(+dp/dtmax)和左室内压最大下降速率(-dp/dtmax)；分离颈外静脉并插入导管以备给药 ......