周小莉，李荣亨(重庆医科大学附属第一医院中西医结合科，重庆市 400016)

    复元胶囊对硝普钠诱导的软骨细胞凋亡与细胞周期作用的实验研究

    周小莉*，李荣亨#(重庆医科大学附属第一医院中西医结合科，重庆市 400016)

    目的：研究复元胶囊含药血清对硝普钠(SNP)诱导的软骨细胞凋亡与细胞周期的作用。方法：雄性3周龄SD大鼠，用于分离培养软骨细胞；雄性成年SD大鼠，用于制备含药血清。将第2代的软骨细胞进行分组实验。透射电镜观察软骨细胞凋亡的超微结构，流式细胞仪检测细胞周期百分率及细胞凋亡率，硝酸还原酶法检测培养液中NO含量。结果：复元胶囊含药血清可使SNP诱导的软骨细胞处于G0/G1期的百分比减少，S期及G2/M期的百分比增加(P<0.05，P<0.01)；可使细胞凋亡率显著降低(P<0.05或P<0.01)，培养上清中NO含量显著降低(P<0.05)。结论：复元胶囊含药血清能显著降低SNP诱导的软骨细胞凋亡率，促进细胞增殖，并降低培养液中NO的含量，这可能是复元胶囊防治骨性关节炎的作用机制之一。

    复元胶囊；软骨细胞；中药；细胞凋亡；细胞周期；一氧化氮

    关节软骨退行性病变是骨关节炎(Osteoarthritis，OA)发病的中心环节，近年研究表明，随着增龄，关节软骨细胞凋亡增加，细胞密度显著降低，软骨变性、丢失，继之邻近软骨增生、骨化而形成骨关节病变，故软骨细胞凋亡在关节软骨退行性改变过程中起着重要作用[1，2]。复元胶囊是临床上长期用于治疗OA有明显疗效的中药复方医院制剂，由人参、淫羊藿、鹿茸、黄芪、川芎、当归、枸杞子等组成，具有补益肝肾、益气活血之功效，对气虚血瘀证患者症状、血液流变学有改善作用，可缓解疼痛，改善OA关节功能[3]，但其作用机制尚不十分清楚。本研究采用透射电镜、流式细胞仪及硝酸还原酶法观察复元胶囊含药血清对硝普钠(Sodium nitroprusside，SNP)诱导的体外培养的软骨细胞凋亡、细胞周期以及培养上清中一氧化氮(Nitric oxide，NO)水平的影响，探讨其防治OA的作用机制。

    1 仪器与材料

    1.1 仪器

    SW-CJ-2A型净化工作台(重庆汇诚空调净化设备制造公司)；2001-13型二氧化碳培养箱(上海常思工贸有限公司)；IX-700型倒置相差显微镜(日本Olympus公司)；FACS Calibur流式细胞分析仪(美国Becton Dickinson公司)；HITACHI-7500型透射电镜(日本Hitachi公司)；生物分光光度计(德国Eppendorf公司) ......