正交试验优选房陵丹参水溶性成分半仿生-纤维素酶提取工艺Δ
浸膏,酚酸,1仪器与试药,2方法与结果,3讨论
蔡 华,杨光义,叶 方,黄良永,王 刚,郝新才(湖北医药学院附属太和医院,十堰市 442000)正交试验优选房陵丹参水溶性成分半仿生-纤维素酶提取工艺Δ
蔡 华*,杨光义#,叶 方,黄良永,王 刚,郝新才(湖北医药学院附属太和医院,十堰市 442000)
目的:优选半仿生-纤维素酶提取法提取房陵丹参水溶性成分最佳工艺条件。方法:以丹酚酸B得率、总酚酸得率和干浸膏收率的综合评分为指标,以酶用量、酶解时间、料液比为考察因素,采用正交试验优选最佳提取工艺。结果:最佳提取工艺为水解酶用量3mg·g-1,酶解时间2h,料液比1∶22。结论:所选工艺合理、可行,可为房陵丹参后续研究提供理论基础。
正交试验;房陵丹参;半仿生-纤维素酶提取法;提取工艺
房陵丹参是湖北省房县产唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根及根茎。丹参水溶性成分有改善微循环、抑制血小板凝聚、减少心肌损伤及抗氧化等作用。2010年版《中国药典》以丹酚酸B为对照品,用高效液相色谱(HPLC)法对丹参水溶性成分进行含量测定[1]。半仿生提取(SBE)法是在常压、相对温度较高的条件下,以不同pH值的水为溶剂进行连续提取,得到含指标成分较高“活性混合物”的一种新提取方法[2]。近年有学者提出,中药经口给药进入消化道后必须在各种酶的参与下药效成分才能发挥作用,在SBE法基础上,发展了半仿生-纤维素酶提取(SBEE)法,即选择适宜的消化酶对中药进行处理,以破坏其细胞壁,再按SBE法在与人体体温相近的温度下进行提取。该法既避免了高温破坏药效活性成分所致药效降低,又体现了酶在药效成分吸收中的作用,更能体现中药的整体作用[3]。为了对房陵丹参进行SBEE法的系统研究,笔者采用正交试验法,以丹酚酸B得率、总酚酸得率和干浸膏收率的综合评分为指标,优选房陵丹参水溶性成分SBEE提取法最佳工艺条件,以为后续对房陵丹参进行质量控制研究奠定基础。
1 仪器与试药
UltiMateTM3000型HPLC仪,包括四元梯度泵、自动进样器、柱温箱、紫外检测器、chromeleon软件数据处理系统(美国戴安公司);TU-1901型紫外分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司);AUW120D型电子天平(日本岛津公司);CQX25-06型超声波震荡器(上海必能信超声有限公司);pHS-25型数显pH计(上海精密科学仪器有限公司)。
丹酚酸B对照品(中国药品生物制品检定所,批号:111562-200807);纤维素酶(酶活力:30U·mg-1 ......
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