柯昌毅，车坷科，王丽娟

    (1.重庆市第三人民医院，重庆市 400014；2.重庆医药高等专科学校，重庆市 400030)

    固相萃取-HPLC法测定MCF-7细胞内、外液中多西他赛的含量

    柯昌毅1*，车坷科1，王丽娟2

    (1.重庆市第三人民医院，重庆市 400014；2.重庆医药高等专科学校，重庆市 400030)

    目的：建立测定人乳腺癌细胞MCF-7内、外液中多西他赛(DOC)含量的方法。方法：采用高效液相色谱法。分别制备细胞内液和细胞外液样品，经三氯乙酸除蛋白，固相萃取柱提取，色谱柱为Symmetry-C18，柱温为30℃，流动相为醋酸盐缓冲液(pH5.0)-乙腈＝50∶50，检测波长为230nm。结果：DOC在细胞内、外液中检测浓度线性范围均为0.05～5.50μg·mL-1(r＝0.9993、r＝0.9990)，平均提取回收率(n＝5)均大于94%，日内、日间RSD(n＝5)均小于5%，最低检测限分别为0.05、0.03μg·mL-1；细胞内液中DOC含量远高于细胞外液。结论：本方法简便、灵敏、干扰小，可用于MCF-7细胞内、外液中DOC含量的测定。

    多西他赛；人乳腺癌细胞MCF-7；细胞内液；细胞外液；固相萃取-高效液相色谱法；含量测定

    多西他赛(Docetaxel，DOC)，又名多西紫杉醇，是作用于细胞周期(M期)的特异性抗肿瘤药，可促进小管聚合成为稳定的微管，并抑制其解聚，使游离小管的数量显著减少，同时通过破环微管的网状结构，抑制细胞有丝分裂从而达到抗肿瘤目的[1，2]。其抗瘤谱较紫杉醇广，是目前临床上治疗转移乳腺癌(MBC)和非小细胞肺癌(NSCLC)最有效的单剂化疗药物[3]。为了定量测定DOC在细胞内、外液中的含量，本研究采用固相萃取(SPE)法快速提取人乳腺癌细胞株MCF-7样品中的DOC，并建立其含量测定的高效液相色谱(HPLC)方法。结果表明，该方法简便、灵敏、干扰小，可进一步用于DOC在人体细胞内、外药动学的相关研究。

    1 仪器与材料

    1.1 仪器

    HPLC系统(美国Waters公司)；BF2000氮气吹干仪(北京八方世纪科技有限公司)；BPN-80CRH二氧化碳培养箱(上海一恒科学仪器有限公司)；TGL-16高速台式离心机(上海安亭科学仪器厂)；SK-1型快速混匀器(上海沪西分析仪器厂)；KQ-500B型超声仪(昆山超声波仪器有限公司)；828型酸度计(美国奥力龙公司)；固相萃取仪(美国Agilent公司)；Bond-Elut C18固相萃取柱(美国瓦力安公司) ......