红外光辅助萃取-HPLC法测定玄参中肉桂酸和哈巴俄苷的含量
1仪器与试药,2方法与结果,1色谱条件,2混合对照品贮备液的制备,3供试品溶液的制备,4系统适用性试验,5线性关系考察,6检测限和定量限确定,7精密度试验,8重复性试验,9加样回收率试验,10稳定性试
黄滔敏,陈念祖,王东蕾,赖永华,闫晶超,顾纪峰(复旦大学附属眼耳鼻喉科医院药剂科,上海市 200031)红外光辅助萃取-HPLC法测定玄参中肉桂酸和哈巴俄苷的含量
黄滔敏*,陈念祖#,王东蕾,赖永华,闫晶超,顾纪峰(复旦大学附属眼耳鼻喉科医院药剂科,上海市 200031)
目的:建立测定玄参中肉桂酸和哈巴俄苷含量的方法。方法:采用红外光辅助萃取-高效液相色谱法。色谱柱为Diamonsil C18(200mm×4.6mm,5μm),流动相为1%乙酸溶液-甲醇(55∶45),柱温为25℃,流速为1mL·min-1,检测波长为278nm,以外标法计算含量。红外光辅助萃取条件的溶剂为甲醇-水(50∶50),提取时间为5min。结果:肉桂酸和哈巴俄苷的检测浓度均在5~100μg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r均为0.9999);二者平均回收率分别为101.7%和103.2%,RSD分别为0.71%和0.93%(n=6)。结论:本方法简便、准确,适用于分析测定玄参中肉桂酸和哈巴俄苷的含量。
红外光辅助萃取;高效液相色谱法;玄参;肉桂酸;哈巴俄苷;含量测定
玄参为常用中药,具有凉血滋阴、泻火解毒之功效,用于治疗目赤、咽痛、舌绛烦渴、津伤便秘、热病伤阴、温毒发斑、骨蒸劳嗽、瘰疬、白喉、痈肿疮毒等证。《中国药典》记载玄参为玄参科植物玄参Scrophularia ningpoensisHemsl.的干燥根。哈巴俄苷为玄参中含量较高的成分,文献报道其具有抗慢性炎症、降压、镇痛、解痉、抗乙肝病毒以及免疫促进作用[1~3]。肉桂酸为玄参中另一重要成分,具有轻泻作用[4,5]。
文献报道分析测定玄参中肉桂酸和哈巴俄苷含量的方法较多的是超声、回流提取和索氏提取等方法。这些方法的缺点是耗时、消耗有机溶剂,且操作烦琐。国内、外尚未见用红外光辅助萃取作为前处理方法分析玄参中肉桂酸和哈巴俄苷含量的文献报道。笔者采用红外光辅助萃取-高效液相色谱法测定玄参中肉桂酸和哈巴俄苷的含量,方法简便、准确、灵敏度高、重复性好,适用于玄参的质量控制。
1 仪器与试药
Agilent 1100型HPLC仪,包括G1322A Degasser在线脱气机、G1311A QuartPump四元泵、G1316A Column柱温箱、G1314AVWD紫外检测器、惠普色谱工作站及20μL手动进样系统(美国惠普公司);Direct-Q纯净水发生器(美国Millipore公司);B5500s-MTH超声波清洗器(上海Branson超声波仪器厂);275W红外灯泡(上海申游照明电器有限公司) ......
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