侯冬枝，梁晓晖，赵世洪，刘长科，平其能，刘军(1.广东药学院，广州市 510006；.中国药科大学，南京市 10009；.南京医科大学第二附属医院，南京市 10011)

    脂质体作为蛋白质、多肽类药物载体，可避免其过早被生物酶降解，增加药物的稳定性，国内、外学者已将其广泛应用到如胰岛素、白细胞介素等生物活性大分子药物的研究中[1，2]。笔者利用逆相蒸发法将牛血清白蛋白(BSA)包封于脂质体中，以增加其稳定性。为检测该脂质体的包封率，笔者将葡聚糖凝胶DEAE-Sephadex A50微柱离心与双波长考马斯亮蓝法/酶标仪法结合，建立了可以用于BSA脂质体包封率测定中对痕量蛋白质检测的方法，所需样品量仅为100 μL，一次即可进行较大量样本的检测，且操作快速、简单、重复性好。

    1 仪器与试药

    1.1 仪器

    BS214D电子分析天平(德国赛多利斯公司)；RE-52A旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器)；循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸公司)；550酶标仪(美国Bio-Rad公司)。

    1.2 试药

    BSA脂质体(批号：20061022，BSA含量：800 ng·mL-1)和空白脂质体(批号：20061011)均由中国药科大学药剂学平其能教授实验室自制；大豆磷脂(以下简称磷脂，上海太伟药业有限公司，注射级)；考马斯亮蓝(美国Amresco公司，G-250型)；BSA(南京生兴科技有限公司，含量：≥98%)；葡聚糖凝胶DEAE-Sephadex A50(美国Pharmcia公司)；胆固醇、95%乙醇、浓磷酸、乙醚、正己烷等均为分析纯。

    2 方法与结果

    2.1 空白脂质体和BSA脂质体的制备

    采用逆相蒸发法制备空白脂质体和BSA脂质体。具体如下：称取处方量磷脂、胆固醇和吐温-80置于茄形瓶中，加入适量混合溶剂(乙醚-正己烷＝10∶1)，待膜材溶解后，滤膜过滤，注射器注入BSA水溶液适量，短时超声使成乳液后，置于0℃冰水浴减压旋转蒸发，至胶态后 ......