倪 晨，王 倩，冯天保(广州中医药大学，广州市 510006)

    肾小球硬化(Glomerular scerosis，GS)是肾小球疾病发展至终末期，肾功能衰竭的主要病理改变。其中细胞外基质(ECM)降解减少、过度积聚，是GS的重要发病机制[1，2]。在ECM降解调控系统中发挥重要作用的是基质金属蛋白酶(MMP)和基质金属蛋白酶抑制物(TIMP)系统[3](MMPs-TIMPs)，随着TIMP-1表达增强，MMP-9降解作用减弱，MMP-9与TIMP-1的比值失调，最终形成肾小球硬化。此外，细胞因子在GS的形成过程中也起着非常关键的作用，其中转化生长因子[4](TGF)-β1的调控作用尤为重要。TGF-β1既能促进ECM合成增加，同时又抑制ECM的降解，最终导致ECM聚积，形成肾小球硬化。本研究针对上述病理机制，选取川芎、鳖甲、海藻[5～7]，配伍组成川芎、川芎+鳖甲、川芎+海藻、川芎+鳖甲+海藻组，分别体现活血祛瘀法，活血祛瘀、散结消癥法，活血祛瘀、化痰散结法，活血祛瘀、化痰、散结消癥法等四则治法，考察祛瘀化痰、散结消癥中药复方对ECM降解调控系统及TGF-β1mRNA的影响。

    1 仪器与材料

    1.1 仪器

    超净工作台(苏净集团苏州安泰空气技术有限公司)；CO2恒温培养箱(美国Harris公司)；TE2000型倒置显微镜(日本Nikon公司)；3000型酶联免疫检测仪(美国BioRad公司)；FA2204B型电子精密天平(上海精密科学仪器有限公司)；7300型荧光定量PCR仪(美国ABI公司)；5810(R)型冷冻离心机(德国Effendorf公司)。

    1.2 试药

    川芎、鳖甲、海藻均购自康美药业股份有限公司，经广州中医药大学中药学院中药鉴定教研室鉴定为真品；福辛普利钠片(蒙诺，中美上海施贵宝制药有限公司，批号：H20090197)，粉碎后用蒸馏水配制成0.33 g·mL-1的溶液；脂多糖(LPS)、MTT(美国Sigma公司)；胎牛血清(FCS)、RPMI 1640培养干粉(美国Gibco公司)；MMP-9酶联免疫吸附法(ELISA)检测试剂盒、TIMP-1 ELISA检测试剂盒(美国RB公司)；First Strand cDNASynthesis Kit(加拿大Fermentas公司)。

    1.3 动物和细胞

    SD大鼠70只，♀♂兼半，体重180～220 g，由广州中医药大学实验动物中心提供(动物合格证号：粤检证字2009A028)；大鼠肾小球系膜细胞(GMC ......