菩人丹超微粉对糖尿病大鼠视网膜VEGF蛋白表达的影响Δ
水蛭,内皮,1仪器与材料,2试药,3动物,2方法,1复制模型,2菩人丹超微粉的组方和制备工艺,3分组和给药,4取材,固定和石蜡切片制作,5免疫组化染色,6结果的测定,7统计学方法,3结果,1免疫组化结果
王海彬,王东华,张铁民(承德医学院附属医院眼科,承德市 067000)糖尿病视网膜病变(Diabetic retinopathy,DR)是糖尿病微血管病变在眼部的重要并发症[1]。从中医学角度讲,其发病辨证为阴虚为本、血瘀为标,治以益气养阴、活血化瘀类中药,临床上可取得较好效果。本课题组利用糖尿病模型大鼠的视网膜石蜡切片进行免疫组化研究,观察了血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白在不同组别的表达情况,旨在研究菩人丹超微粉在早期DR治疗中的作用。
1 仪器与材料
1.1 仪器
E600型光学显微镜(日本尼康公司);ONE TOUCH血糖仪(强生(中国)有限公司)。
1.2 试药
人参、丹参、制何首乌、葛根、水蛭均由河北省承德医学院附属医院中药房提供,由河北省承德医学院附属医院王东华主任药师鉴定为真品;链脲佐菌素(STZ,美国Sigma公司);苦瓜由笔者购买。
1.3 动物
健康Wistar大鼠60只,♂,体重150~200 g,由中国医学科学院放射医学研究所实验动物中心提供(动物生产许可证号:SCXK(津)2005-0001)。
2 方法
2.1 复制模型
将STZ溶于0.05 mol·L-1柠檬酸缓冲液(pH 4.5),制备成浓度为1.25%的溶液,随机选取50只大鼠,ip STZ 60 mg·kg-1以诱发糖尿病,另外10只作为正常组,仅ip同样体积的柠檬酸缓冲液,注射3 d后用血糖仪测血糖,用尿糖试纸测尿糖浓度,以血糖>16.5 mmol·L-1、尿糖(++++)、尿量以及饮水明显增多者作为实验对象。
2.2 菩人丹超微粉的组方和制备工艺
2.2.1 组方 苦瓜原汁10 kg,人参1 kg,丹参3 kg,制何首乌1 kg,葛根1 kg,水蛭0.3 kg。
2.2.2 制备工艺 苦瓜原汁10 kg ......
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