红花注射液对大鼠周围神经缺血再灌注损伤的保护作用及其机制研究
对模型,甘露醇,1仪器与材料,2试药,3动物,2方法,1复制周围神经IR模型,2分组和给药,3肢体功能评估方法,4SOD活性检测,5MDA含量检测,6ELISA法检测TNF-α水平,7神经电生理指标
彭其胜(重庆市涪陵中心医院,重庆市 408000)周围神经缺血再灌注(IR)损伤在临床上较常见,多继发于创伤、血栓形成、断肢再植、筋膜间隙综合征、肢体大动脉损伤以及较长时间应用止血带等造成周围神经缺血,在恢复血流灌注后不仅不能改善神经功能,反而进一步加重组织损伤[1]。
红花(Carthamus tinctorius),又叫草红、刺红花、杜红花、金红花,为菊科植物红花的管状花。红花是一味传统的活血祛瘀中药,研究发现,其具有扩张血管、改善微循环、抗炎、清除自由基等功能[2]。红花注射液为红花经现代制药工艺分离提取制备而成,临床上多用于心脑血管疾病和糖尿病周围神经炎的治疗。动物研究发现,红花注射液对肠IR损伤具有保护[3],能否将红花注射液用于周围神经IR损伤尚未见报道。本研究拟采用周围神经IR大鼠模型,初步探讨红花注射液在周围神经IR损伤中的保护作用及其机制,为临床防治周围神经IR损伤提供依据。
1 仪器与材料
1.1 仪器
3K30型超低温离心机(德国Sigma公司);550型酶标仪(美国Bio-Rad公司);UV-265紫外-可见分光光度计(日本岛津公司);Evomatic-8000诱发型电位仪(丹麦Dantec公司);电感耦合等离子体原子发射光谱仪(美国PE公司)。
1.2 试药
红花注射液(雅安三九药业有限公司,批号:100105,规格:5 mL/支);20%甘露醇注射液(石家庄四药有限公司,批号:101105235,规格:50 g∶250 mL);超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)试剂盒均购自南京建成生物工程研究所;肿瘤坏死因子(TNF)-α酶联免疫法(ELIA)试剂盒购自天津康尔克生物科技有限公司。
1.3 动物
Ⅰ级纯种SD大鼠,♂,体重180~200 g,由重庆医科大学实验动物中心提供(动物合格证号:SCXK(渝)20020001)。
2 方法
2.1 复制周围神经IR模型
参照文献[4]复制周围神经IR模型。SD大鼠以4%水合氯醛ip麻醉,固定,剪开一侧腹股沟部皮肤,用10 g捏持力的无损伤动脉夹阻断髂总动脉起始处,再用2个同样的动脉夹夹于髂内、髂外动脉的起始处,静脉血管不予阻断,6 h后松开动脉夹,恢复血流。对照大鼠仅分离暴露髂总动脉、髂内动脉和髂外动脉6 h。
2.2 分组和给药
30只大鼠随机分为对照(等容生理盐水)、模型(等容生理盐水)、甘露醇(20% ......
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