韦桂宁，何德明，宋大彦，李艳，梁宁生#(.广西医科大学附属肿瘤医院，南宁市5002；2.广西中医药研究院，南宁市50022；.石家庄医学高等专科学校药理教研室，石家庄市05008)

    近年来，无论在国内还是国外，真菌感染率均有上升的趋势，严重地威胁着人类的健康。与抗细菌感染药物相比，抗真菌药物存在种类少、选择性小、毒副作用大的缺点[1]，故加紧研究和开发新型高效、低毒、广谱的抗真菌药物迫在眉睫。脊椎动物除天然拥有一整套高度特异性的、以细胞为核心的免疫系统外，还拥有一套由不同的抗菌蛋白/肽组成的高效、广谱的防御系统。与传统的抗生素相比，抗菌蛋白/肽具有杀菌快速、广谱且致病菌很难对其产生抗药性等优点[2，3]。

    本文以大鼠为实验动物，腹腔注射金黄色葡萄球菌诱导产生细菌性感染的炎症模型，收集其腹腔炎症渗出液，经过离心得到富含蛋白的上清液。以常见的真菌如白色念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌为研究目标，研究该上清液对真菌的杀菌作用。观察温度对该上清液抗白色念珠菌作用的影响，并在显微镜下观察该上清液对白色念珠菌的杀灭过程。由此，为新型天然抗真菌药物的研究提供依据。

    1 仪器与材料

    1.1 仪器

    THZ-C恒温振荡器、HWS-20恒温水浴箱(江苏太仓市实验设备厂)；隔水式电热恒温培养箱(上海跃进医疗器械一厂)；721分光光度计(上海第三分析仪器厂)；显微镜(日本Olympus公司)。

    1.2 试药

    RPMI-1640培养基(美国Gibco-Brl公司)；LB培养基粉(上海生工生物工程有限公司)；沙保罗氏琼脂(杭州天和微生物试剂有限公司)；小牛血清白蛋白(BSA，武汉生命技术有限公司分装)。

    1.3 动物

    Wistar大鼠，♂，体重(300±50)g，由广西医科大学实验动物中心提供，动物许可证号:SCXK桂2003-0003。

    1.4 菌株

    金黄色葡萄球菌(广西医科大学微生物学教研室，批号:ATCC26003)；白色念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌(均从广西医科大学附属肿瘤医院疑似相应念珠菌感染的8名患者身上分离得到，菌株分离纯化后经鉴定确认)。

    2 方法

    2.1 金黄色葡萄球菌液的制备

    制备对数生长期金黄色葡萄球菌，即挑取少量菌种接种于新鲜LB培养液中，37℃、190 r·min-1振摇过夜。将过夜培养液按1∶50接入新鲜LB培养液中，37℃、190 r·min-1振摇 ......