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编号:454091
衍生自人ⅡA型磷脂酶A2碳末端的多肽C-26杀菌作用研究Δ
http://www.100md.com 2011年8月7日 中国药房 2011年第25期
残基,1材料,1细菌,2试药,3仪器,2方法,1不同哺乳动物ⅡA型PLA2氨基酸顺序(蛋白质一级结构)的获取与分析,2多肽C-26的制备与配制,3杀菌试验,3结果,1不同哺乳动物ⅡA型PLA2蛋白质一
     何睿林,梁宁生(广西医科大学附属肿瘤医院,南宁市530021)

    对于抗菌多肽(Antimicrobial peptides)的研究已有较长的历史,这类多肽对细菌和/或真菌都有杀菌作用。最初的研究主要集中在生物体内天然存在的抗菌多肽,无论是低等生物昆虫体内,还是高等生物哺乳动物体内,都存在这类物质,其是生物天然免疫系统里一类抵抗微生物感染的重要武器[1]。对抗菌多肽的研究有助于揭示生物抵抗感染的机制,也有助于抗感染药物的开发。

    目前,除生物体内天然存在的抗菌多肽以外,抗菌多肽的研究还向2方面扩展:一是根据抗菌多肽的一些特性,利用计算机辅助设计和合成具有抗菌作用的多肽(非天然的)[2];二是根据已知的一些蛋白分子结构,如血红蛋白分子结构,模拟合成这些分子的部分结构,也就是一些多肽片段,其也具有杀菌作用[3]。本研究是根据人ⅡA型磷脂酶A2(ⅡA型PLA2)分子的结构(全长为124个氨基酸残基),合成其碳(C)末端26个氨基酸残基的多肽C-26。现对其杀菌作用进行初步研究。

    1 材料

    1.1 细菌

    3种革兰阳性(G+)细菌:金黄色葡萄球菌(ATCC26003)、枯草杆菌(ATCC63501)、炭疽杆菌(ATCC63065),3种革兰阴性(G-)细菌:大肠杆菌(ATCC44113)、变形杆菌(ATCC49027)、绿脓杆菌(ATCC10104),以上标准菌株均由广西医科大学微生物学教研室提供,购自中国食品药品检定研究院。

    1.2 试药

    多肽C-26(由梁宁生教授设计,上海波泰生物公司合成和纯化,批号:10101321);羟乙基哌嗪乙硫磺酸(Hepes)、1%小牛血清白蛋白(北京Solarbio公司);LB培养基粉(上海生工生物工程有限公司);LB营养琼脂(北京陆桥技术有限责任公司);无水氯化钙(CaCl2,成都科隆化工试剂厂生产,批号:20081106);RPMI-1640培养基(美国Gibco-Brl公司)。

    1.3 仪器

    Anke TGL-16C台式离心机(上海安亭科学仪器厂);TU-1810S紫外分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司);Thermo 420型恒温气浴摇床(新加坡Thermo Electron公司);HWS-20恒温水浴箱(江苏太仓市实验设备厂);J3-NAPCO-5410型CO2培养箱(克勒格瓦尼(上海)分析仪器有限公司) ......

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