经熊去氧胆酸治疗妊娠期肝内胆汁淤积症孕妇血清胆汁酸谱分析Δ
纯度,1材料,1仪器,2试药,2方法,1色谱及质谱条件5,2研究对象,3ICP诊断及纳入,排除标准6,4ICP治疗方案,5样品预处理与测定5,6方法学验证,7统计学分析,3结果,1ICP治疗组和正常对
凌玲,刘兆明,邵勇#,王富兰(1.重庆市红十字会医院,重庆市40000;.重庆医科大学附属第一医院,重庆市400016)妊娠期肝内胆汁淤积症(Intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)是妊娠期特有的并发症。ICP对胎儿影响较大,可发生胎儿窘迫和妊娠晚期不可预测的胎儿突然死亡。目前治疗ICP的主要药物是熊去氧胆酸(Ursodeoxycholic acid,UDCA)和腺苷蛋氨酸(S-adenosy-L-methione,SAMe)。国外大多推荐UDCA作为治疗的一线药物[1]。ICP最显著的生化异常是血清中胆汁酸水平升高。人体内代谢的胆汁酸主要为5类游离型胆汁酸,即胆酸(Cholic acid,CA)、鹅去氧胆酸(Chenodeoxycholic acid,CDCA)、去氧胆酸(Deoxycholic acid,DCA)、石胆酸(Lithocholic acid,LCA)和UDCA以及它们的甘氨(Glyco-,G)和牛磺(Tauro-,T)结合型胆汁酸[2]。ICP孕妇妊娠中晚期血清总胆汁酸明显升高,其中以甘氨胆酸(GCA)和牛磺胆酸(TCA)为主的结合型胆汁酸升高最为显著,游离型胆汁酸变化不大[3,4]。本研究采用高效液相色谱串联质谱(High performance liquid chromatography-tendem mass spectrometry,HPLC-MS/MS)法检测UDCA治疗ICP孕妇的血清胆汁酸谱的变化,为临床的决策提供依据。
1 材料
1.1 仪器
API2000 HPLC-MS/MS仪,配备Perkin Elmer200泵和tubro离子源(加拿大Applied Biosystems公司);Miliolpore真空泵和Waters part No WaT086344型吹氮装置(美国Waters公司);DL-1型固相萃取器(国家色谱研究分析中心);LD5-2A离心机(北京医用离心机厂);SZ-93自动双重纯水蒸馏器(上海亚荣生化仪器厂);Libroafl-200天平(日本Shimadzu公司);SB-3200超声波清洗器(宁波新芝科器研究所);Modular 800全自动生化分析仪(瑞士罗氏公司)。
1.2 试药
CA标准品(批号:81-25-4,纯度≥98%)、CDCA标准品(批号:83-44-3,纯度≥99%)、牛磺石胆酸(TLCA)标准品(批号:345909-26-4,纯度≥95%)、LCA标准品(批号:434-13-9 ......
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