丹参抑制人粘连成纤维细胞增殖的作用研究Δ
胶原,1仪器与试药,2试药,2方法与结果,1粘连成纤维细胞(AFB)的体外培养,2丹参对AFB增殖活性的影响,3丹参对AFBTGF-β1mRNA表达水平的影响,3讨论
曾煦欣,王芳,蒋泓,邝嘉乐(.佛山科学技术学院医学院药学实验室,佛山市 528000;2.广东药学院中药学院中药药剂系,广州市 50006)腹部手术后粘连(术后粘连)是腹膜受到手术损伤与刺激后,脏器之间、脏器与腹壁之间产生的纤维性粘连,发生率达90%以上,常导致腹部慢性疼痛和女性不孕,严重者可发展为肠梗阻甚至死亡[1]。研究显示,丹参可通过抑制胶原生成、促进胶原降解预防术后粘连生成,但具体机制尚未明确,影响其进一步推广应用[2]。在粘连形成过程中,成纤维细胞的增殖与胶原合成是主要因素[3],因此该细胞很可能是丹参防治术后粘连的作用靶点。为证实这一推测,本研究利用MTT法与Real-time PCR法考察丹参及其主要成分对成纤维细胞增殖的影响,对该药防治术后粘连的具体机制与物质基础进行探讨。
1 仪器与试药
1.1 仪器
细胞培养板、培养皿与培养瓶(美国Cornig公司);E045型CO2培养箱(德国Binder公司);超净台(苏州安泰空气技术有限公司);DM-IRB型倒置显微镜(德国Leica公司);3K18型台式低温冷冻离心机(美国Sigma公司);680型酶标仪、MiniOpticon型Real time PCR仪(美国Bio-Rad公司);TGRADIENT型PCR仪(德国Biometra公司)。
1.2 试药
丹参冻干粉(南方医院药学部提供,丹参素含量8%~15%,批号:20070630);丹参素钠对照品(批号:110781-20091)、丹参酮ⅡA磺酸钠对照品(批号:111605-200301)由中国药品生物制品检定所提供;地塞米松注射剂(成都天台山制药有限公司 ......
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