硅胶柱层析-RP-HPLC法同时测定火麻仁中3种大麻酚类化合物的含量Δ
1仪器与试药,2方法与结果,1色谱条件,2对照品溶液的制备,3供试品溶液的制备,4线性关系考察,5精密度试验,6重复性试验,7稳定性试验,8加样回收率试验,9样品含量测定,3讨论,1色谱条
夏林波,郭莹,邓仕任(辽宁中医药大学药学院,大连市 116600)火麻仁又名大麻仁、麻子仁,为桑科植物大麻Cannabis sativa L.的干燥成熟果实[1],始载于《神农本草经》,是一味亦药亦食的润下药,具有润燥滑肠、活血之功效,在临床上广泛用于治疗肠燥便秘、血虚津亏等证。同时,由于其还含有丰富的脂肪油和麻仁球蛋白,具有较高的营养价值,近年来在保健食品领域的应用也日益广泛[2]。然而,火麻仁有“小毒”,一次性大剂量服用火麻仁(30~60 g)会产生恶心、呕吐、四肢麻木、昏迷、瞳孔散大等中毒症状,这主要与其含有一类对神经系统起强烈致幻作用的物质——大麻酚类物质有关[3]。研究表明,火麻仁中含有60余种大麻酚类化合物[3],但主要成分为以下3种:Δ9-四氢大麻酚、大麻酚和大麻二酚,其中Δ9-四氢大麻酚对中枢神经的作用最强,且能与另2种成分进行相互转化。因此,严格控制火麻仁中该3种成分的含量具有重要意义。
到目前为止,对该类成分进行质量控制的研究主要集中在大麻树脂提取物[4,5]和火麻仁油脂[6,7]上,而对火麻仁整体药材中大麻酚类化合物的含量测定却鲜有报道[8],更未见对该3种主要成分同时进行含量测定的研究。由于火麻仁在临床使用中都是以整体药材入药,因此直接测定整体药材中大麻酚类物质的含量就显得尤为重要。此外,由于火麻仁中含有大量油脂[9],其对大麻酚类成分的测定会造成严重的干扰,因此在采用高效液相色谱(HPLC)法进行含量测定之前,必须采用适当的预处理方法进行样品的纯化。基于上述分析,本试验通过硅胶柱层析纯化技术,结合反相高效液相色谱(RP-HPLC)法,对火麻仁整体药材中的3种大麻酚类化合物进行含量测定,以为火麻仁的质量控制与临床合理安全用药提供参考依据。
1 仪器与试药
Agilent 1100 Series HPLC仪,包括在线真空脱气机、低压四元梯度泵、柱温箱、紫外检测器、Agilent LC色谱工作站(美国安捷伦科技有限公司);AR2140电子分析天平(上海力能电子仪器有限公司);Milli Q纯水系统(美国密理博公司);RE-52CS旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);U-3010紫外-可见分光光度计(日本岛津公司);舒美KQ2200超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司,功率:100 W,工作频率:40 kHz);HH-4数显恒温水浴锅(常州国华仪器有限公司)。
大麻二酚(批号:1235-9907)、大麻酚(批号:171234-200809)、Δ9-四氢大麻酚(批号:171236-200609)对照品均购自中国药品生物制品检定所 ......
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