花椒RAPD-PCR反应体系的建立与优化Δ
青椒,引物,1仪器与试药,2试药,2方法与结果,1DNA的提取,2DNA的检测,3PCR体系,4PCR程序,5扩增产物的检测,6RAPD-PCR体系的稳定性考察,3讨论
宋丽,刘友平(1.成都中医药大学药学院中药材标准化教育部重点实验室,成都市611137;2.成都医学院药学院,成都市 610083)随机扩增的多态性DNA(Random amplified polymorphic DNA,RAPD),是美国的Williams和Welsh两个研究小组于1990年同时提出的一种以聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)为基础,运用随机引物扩增,寻找多态性DNA片段的遗传标记技术,具有快速、简便、成本低、DNA用量少、应用范围广等优点[1]。
花椒(Zanthoxyli Pericarpium)为芸香科花椒属植物青椒(Zanthoxylum schinifoliumSieb.et Zucc.)或花椒(Z.bungeanumMaxim.)的干燥成熟果皮,具有“温中止痛,杀虫止痒”的功效[2]。花椒为川产道地药材,甘孜、阿坝、凉山州等地均有栽培,但各地药材质量存在差异[3],因此有必要研究不同产地花椒与青椒的遗传多样性,为花椒的鉴定、选种提供依据。由于目前还未见有关花椒与青椒RAPD-PCR分析方面的报道,因此本文所建立的反应体系可为花椒与青椒的遗传多样性研究打下良好基础。
1 仪器与试药
1.1 仪器
MyCycler型梯度PCR仪、Geldoceq型紫外凝胶成像分析仪(美国Bio-Rad公司);TGL-16G型高速离心机(上海嘉鹏科技有限公司);HB-100型恒温金属浴(杭州博日科技有限公司);DYY-Ⅲ2型稳压稳流电泳仪(北京市六一仪器厂);MDF-U50V型超低温冰箱(日本Sanyo公司)。
1.2 试药
花椒采自四川省内花椒(Z.bungeanumMaxim.)、青椒(Z.schinifoliumSieb.et Zucc.)的嫩叶或嫩芽 ......
您现在查看是摘要页,全文长 6710 字符。