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编号:454546
山楂叶总黄酮对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用研究
http://www.100md.com 2011年8月10日 中国药房 2011年第35期
尼莫地平,低剂量,1仪器与材料,2试药,3动物,2方法,1模型的复制6,2分组和给药,3神经学评分6及脑梗死体积7测定,4大脑皮层及海马区病理切片,5缺血侧脑组织MDA,NO含量及SOD活力测定,6统计学方法
     刘俊芳,连建学,李昌俊,郑瑶,郭莲军(.河南科技大学第一附属医院,洛阳市4700;.河南科技大学医学院,洛阳市 4700;.华中科技大学同济医学院,武汉市 4000)

    山楂叶总黄酮(HLF)是从蔷薇科山楂属植物山里红Crataegus pinnatifida Bge.Var.major N.E.Br或山楂G.pinnatifida Bge.的干燥叶中提取的活性成分。据国内众多文献报道,HLF主要具有降低血脂[1]、抗氧化[2]、抗心肌缺血缺氧[3,4]、抗血栓和降血压[5]等药理作用。关于HLF抗心肌缺血的报道较多,但其抗脑缺血及对神经细胞的保护作用少见报道。本文采用改良Zea Longa’s法复制大脑中动脉闭塞(MACO)模型,用神经功能评分评价大鼠脑缺血再灌注后行为障碍;用2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色法测定梗死灶体积;用相应试剂盒测定脑组织内丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活力,从整体、细胞等不同水平探讨HLF抗脑缺血、保护神经细胞的作用及可能机制,为脑缺血疾病的有效治疗提供理论依据。

    1 仪器与材料

    1.1 仪器

    680型酶标仪(美国Bio-Rad公司);3500型台式高速冷冻离心机(日本Kubota公司);BI-2000型图象分析系统(成都泰盟科技公司);超低温(-80℃)冰箱(美国Thermo Revco公司);DHW-600型电热恒温水浴箱(北京路业通达科技有限公司);CX31型光学显微镜、DP10型实体显微镜、AX 70型显微照相装置(日本Olympus公司);G5型照相机(日本佳能公司)。

    1.2 试药

    尼莫地平(德国拜耳公司,批号:BXCC80121);HLF(晋城中晋药业有限公司,批号:20071203,纯度:95%);白介素-1β(IL-1 β)放免药盒(南京建成生物工程研究所,批号:20080627);肿瘤坏死因子-α(TNF-α)放免药盒(北京普尔伟业生物科技有限公司,批号:20080627)。

    1.3 动物

    SPF级成年健康SD大鼠72只,♂,体重190~260 g,由郑州大学实验动物中心提供(实验动物许可证号:SCXK(豫)2005-0001)。室温下适应性喂养1周后开始实验。

    2 方法

    2.1 模型的复制[6]

    大鼠用10%水合氯醛(350 mg·kg-1)ip麻醉,仰卧固定,颈部正中线切口 ......

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