美宝湿润烧伤膏对大鼠深Ⅱ度烫伤创面的保护作用研究
内毒素,血浆,1仪器与材料,2试药,3动物,2方法,1模型的复制和分组,给药,2标本收集,3大鼠创面愈合情况观察,4LPS检测,5ELISA检测,6流式细胞术检测,7统计学方法,3结果,1各组大鼠创面愈合时间及
张莉,高志军,赵静(.西藏大学医学院,拉萨市850000;.西藏当雄县人民医院,当雄县85500)严重烧烫伤早期因肠黏膜屏障功能受损会导致肠道细菌和内毒素移位,激活炎症以及后续的代偿性抗炎反应和免疫系统自我保护作用,最终导致机体免疫失衡,从而引起全身炎症反应综合征(Systemic inflammatory response syndrome,SIRS),进而导致多器官功能障碍综合征(Multiple Organs Dysfunction syndrome,MODS)。国外研究证实,大鼠Toll样受体4(TLR4)信号通路及下游相关的效应分子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)参与了烧伤后炎症的发生[1]。有研究发现,作为TLR4的配体脂多糖(LPS)也在烧伤后续炎症反应中发挥着重要的作用[2,3]。
美宝湿润烧伤膏(MEBO)主要成分包括黄连、黄柏、黄芩、地龙、罂粟壳,具有清热、解毒、止痛、生肌功效,广泛用于治疗各种烧、烫、灼伤。在本研究中,笔者将MEBO运用于烫伤大鼠,观察其对烫伤大鼠创面愈合和TLR4/LPS信号通路及TNF-α、IL-6的影响,初步阐明其对烫伤后炎症的相关作用机制,为烧烫伤创面愈合的临床治疗提供理论依据。
1 仪器与材料
1.1 仪器
FACS Calibur型流式细胞仪(美国BD公司);680型全波长酶标检测仪(美国Bio-Rad公司);721型分光光度计(上海菁华科技仪器有限公司);内毒素检测试剂(鲎试剂)动态检测仪(北京时代新光生物技术有限公司)。
1.2 试药
MEBO(汕头市美宝制药有限公司,批号:Z20000004);鲎试剂(上海坤肯生物化工有限公司);PE标记的大鼠TLR4单克隆抗体、FITC标记的鼠免疫球蛋白G(IgG)均购自美国BD公司;红细胞裂解液、TNF-α、IL-6 ELISA检测试剂盒(深圳晶美生物技术公司)。
1.3 动物
大鼠30只,♂,体重280~320 g,由第三军医大学实验动物中心提供(动物合格证号:24301050)。
2 方法
2.1 模型的复制和分组、给药
将30只SD大鼠随机均分为空白对照、模型对照和MEBO组。除空白对照组外,其它大鼠在清醒状态下,以200 g·L-1硫化钠背部脱毛;200 g·L-1的乌拉坦溶液按5 mL·kg-1ip麻醉,置电热恒浴中致背部烫伤(108℃ ......
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