HPLC指纹图谱结合系统聚类分析法对灵芝孢子油质量的研究
破壁,1仪器与试药,2方法与结果,1灵芝孢子油供试品溶液的制备,2参照峰的选择,3色谱条件与系统适用性试验,4测定方法,5方法学考察,6HPLC指纹图谱的建立,7系统聚类分析,3分析,1产地分析,2采收
冯柏康,李其凤,李卫民,肖 飞(广州中医药大学,广州市 510405)灵芝孢子油是以灵芝Ganoderma lucidum(Leysds.Fr.)Karst.在生长成熟期产生的孢子为原料,采用超临界CO2技术获得的提取物。现代药理研究证明,灵芝孢子油具有多种生物活性。目前,在已上市的灵芝孢子油中,多以灵芝总三萜作为产品的功效性成分,大部分厂家在测定该成分时采用的是分光光度法。在试验应用中,笔者发现这种方法的专属性、稳定性及重复性均较差,测定结果难以准确反映灵芝孢子油中三萜类成分的含量。同时,灵芝孢子油中是否含有灵芝三萜在学术界仍存在一定的争议,灵芝孢子油的质量控制标准仍需进一步深入研究。鉴于此,笔者采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法,按照《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)》[1],对灵芝孢子油进行分析,建立灵芝孢子油HPLC指纹图谱[2],尝试为灵芝孢子油的质量控制提供一种新思路;并采用系统聚类法[3,4]对样品的指纹图谱进行分析,考察不同采收时间、产地及破壁工艺对灵芝孢子油质量的影响。
1 仪器与试药
2695型HPLC仪、2420型蒸发光散射检测器、WATERS EMPOWER色谱工作站(美国Waters公司)。
甲醇、异丙醇为色谱纯;甘油三油酸酯对照品(中国药品生物制品检定所,批号:111692-200901);样品由广州中医药大学首席教授徐鸿华提供并鉴定,为灵芝菌科灵芝G.lucidum(Leysds.Fr.)Karst.破壁孢子的超临界CO2提取物 ......
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