预防性使用英夫利西单抗对肺气肿模型大鼠气道炎症的影响研究Δ
1仪器与材料,2试药,3动物,2方法,1分组给药,2BALF中炎症细胞计数和分类计数与血清和BALF中TNF-α,IL-8,MMP-9的检测,3肺组织病理变化检测和形态定量分析,4统计学处理,3结果
张 程,张湘燕,罗溶溶,饶珊珊,夏 婧,张族勤,朱绍英(贵州省人民医院呼吸内科,贵阳市 550002)肿瘤坏死因子-α(TNF-α)能参与慢性阻塞性肺疾病(COPD)气道炎症的形成[1~3],因此其在肺气肿等发病中的作用越来越受到重视。在国外,相关研究[4]提示,给予英夫利西单抗(TNF-α抑制剂)后,COPD患者气道炎症无明显改善,考虑得到该结果的可能原因是其评估的是英夫利西单抗的治疗作用而非其预防作用。本实验采取单纯香烟熏吸方法建立肺气肿大鼠模型,观察预防性使用英夫利西单抗对模型大鼠血清和支气管肺泡灌洗液(BALF)中TNF-α、白介素(IL)-8、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平及BALF中炎症细胞计数、分类计数的影响,旨在探讨预防性使用英夫利西单抗对模型大鼠气道炎症的影响,为临床上寻找该类疾病可行的预防方法提供理论依据。
1 仪器与材料
1.1 仪器
550酶标仪(美国Bio-Rad公司);DL-5低速大容量离心机(上海安亭科学仪器厂)。
1.2 试药
黄果树香烟(贵阳市卷烟厂,焦油含量:每盒19 mg);英夫利西单抗(瑞士Cilag AG公司,批号:S20060024,规格:每瓶100 mg);大鼠TNF-α、IL-8、MMP-9酶联免疫吸附(ELISA)检测试剂盒(上海史瑞可生物科技有限公司)。
1.3 动物
清洁级SD大鼠39只,♂,体重180~252 g,鼠龄10周,购自重庆第三军医大学实验动物中心,生产合格证号:SCXK(渝)2007-0005。
2 方法
2.1 分组给药
将大鼠随机分为正常对照组、模型组和干预组,每组13只,参照笔者已发表文章[5]中自制的大鼠实验性被动吸烟装置对后2组建立肺气肿模型。烟雾暴露达1个月时,以英夫利西单抗对干预组进行干预,皮下注射,10 d 1次,按照文献[6]报道剂量给药,药物经生理盐水溶解,每次给药剂量为5 mg·kg-1,给药量为0.2 mL。正常对照组和模型组大鼠皮下注射生理盐水,10 d 1次,每次0.2 mL。实验过程中,模型组大鼠第40天时死亡1只,干预组第70天时死亡1只,原因均不明。第71天终止英夫利西单抗干预,第74天终止所有处理进行检测。
2.2 BALF中炎症细胞计数和分类计数与血清和BALF中TNF-α、IL-8、MMP-9的检测
血清和BALF的收集方法[5]:各组大鼠终止所有处理后 ......
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