赵变，常珍珍，史彪，孙祥德(新乡医学院药学院，新乡市453003)

    四大怀药包括牛膝、地黄、山药、菊花，是著名的河南道地药材，产于焦作。其中，牛膝为苋科植物牛膝Achyranthes bidentataBl.的干燥根，味苦、甘，性平，归肝、肾经。能补肝肾、强筋骨、逐瘀通经、引血下行，用于治疗腰膝酸痛、筋骨无力、肝阳眩晕[1]等证。2010年版《中国药典》(一部)中将牛膝类药材分为牛膝和川牛膝2种收录。现代中药化学和药理学研究表明，牛膝中含有皂苷类[2]、植物甾酮类[3]、糖类[4]、黄酮类等化学成分。人们对牛膝的药理、毒理及其化学成分等方面的研究逐渐深入，但尚缺少综合评价药材品质的方法和标准。目前，通过建立指纹图谱来控制中药的质量已成为越来越多人的共识[5]，但有关怀牛膝的指纹图谱研究少见报道，仅有的文献方法[6]存在组分峰相对较小、分离度不高、未经相似度评价等不足。因此，本试验采用高效液相色谱(HPLC)法建立了怀牛膝原药材和经硫磺熏制过的怀牛膝药材的指纹图谱，并进行了相似度比较，以期为该药材的全面质量控制提供依据。

    1 仪器与试药

    SHIMADZU LC-6AD型HPLC仪、SPD-20A型紫外检测器(日本岛津公司)；FA2004型分析天平(上海良品仪器有限公司)；超声波清洗器(工作频率：59 kHz，功率：45 W，上海科导超声仪器有限公司)。

    甲醇(色谱纯，天津赛孚瑞科技有限公司)；冰醋酸(分析纯，天津市德恩化学试剂有限公司)；5-羟甲基糠醛标准品(批号：A0298，纯度>99%)、蜕皮甾酮标准品(批号：A0217，纯度>99%)均购自成都曼思特生物科技有限公司；试验所用原药材和熏制药材均购自河南道地产区GAP示范基地，并经新乡医学院药学院中药学教研室荆云副教授鉴定为真品(药材来源见表1)，将药材粉碎，过二号筛，置广口瓶中密塞备用[硫磺熏制方法：将药农初加工后牛膝放入缸内，反复冲水洗净泥土，放入牛膝焙中，点燃硫磺锅，用草苔覆盖，按每100 kg牛膝用硫磺2 kg熏制8 h；然后用大锅将水温成100℃，把牛膝带茎端(茎下3 cm)用水冲洗1 min后闷放2 h，再冲清水，放入牛膝焙中，按每100 kg牛膝用硫磺1 kg熏蒸6 h]。 ......