林 慧，梅全喜，孔祥廉#，王书芹，王云庭(.广州中医药大学附属中山中医院，中山市528400；2.广东中山市中医药研究所，中山市 528400)

    蛇黄肝炎汤为广州中医药大学附属中山中医院院内制剂，临床应用具有清热解毒、益气护肝等功效。本课题组通过前期实验，观察到蛇黄肝炎汤在乙型肝炎病毒(HBV)基因转染的人肝癌细胞系2215细胞培养中，对2215细胞分泌表面抗原(HBsAg)和e抗原(HBeAg)具有明显的抑制作用[1]，但对其肝损伤保护作用的研究尚属空白。因此，本研究采用四氯化碳(CCl4)制备小鼠急性肝损伤模型，探讨蛇黄肝炎汤对急性肝损伤的保护作用。

    1 仪器与材料

    1.1 仪器

    UV-754型紫外-可见分光光度计(日本岛津公司)；GL-20G-Ⅱ型高速冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂)；F6/10型超细匀浆机(弗鲁克(上海)流体机械制造有限公司)；微量移液器(上海求精生化试剂仪器有限公司)；BS224S型电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司)；恒温水浴箱(上海衡平仪器仪表厂)。

    1.2 试药

    蛇黄肝炎汤由白花蛇舌草、田基黄、蒲公英、虎杖等9味中药组成，中药材购于广州致信中药饮片有限公司，由广州中医药大学附属中山中医院制剂室鉴定为真品并煎煮；联苯双酯滴丸(广州星群(药业)股份有限公司，批号：IF40003)，临用前以超细匀浆机研磨成细末，加生理盐水溶解并经超声处理，配制成含药量为0.2 g·mL-1的溶液，备用；CCl4(分析纯，广州化学试剂公司)；橄榄油(化学纯，国药集团化学试剂有限公司，批号：F20100512)；丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。

    1.3 动物

    健康SPF昆明种小鼠，♀♂兼半，体重(20±2)g，由广州中医药大学实验动物中心提供(动物生产许可证号：SYXK(粤)2008-0001)。实验前动物饲养于中山市中医院SPF级动物实验室，适应性饲养1周，按性别分笼饲养，自由进食、饮水，环境温度为(20±2)℃，相对湿度为70%。

    2 方法

    2.1 供试液的制备

    取蛇黄肝炎汤各味干燥药材，用10倍体积的蒸馏水浸泡1 h，加热煮沸2 h，趁热过滤，药渣再加8倍体积的蒸馏水加热煮沸1 h，趁热过滤，合并2次滤液，浓缩至含生药量为0.67 g·mL-1的煎液 ......