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编号:187231
银杏内酯B对胚胎大鼠中脑神经细胞的作用研究
http://www.100md.com 2011年8月7日 中国药房 2011年第47期
脂质,1仪器与材料,2试药,3动物,2方法,1胚胎大鼠中脑神经细胞悬液的制备,2胚胎大鼠中脑神经细胞的原代培养,3分组,4神经元鉴定,5中脑神经细胞内MDA,NO含量和SOD活性测定,6统计方法,3结果,1NSE免疫
     谭才宏,钱小蔷,马洪峰(.江苏大学附属医院药剂科,镇江市00;.江苏丹阳市人民医院药剂科,丹阳市 300)

    银杏提取物含有多种活性成分,包括银杏内酯A、B、C、M、J和白果内酯。银杏内酯B(GBE)具有抗炎、抗过敏、抗休克、抗肿瘤等广泛的生物学作用。其不但对缺血、缺氧等多种因素引起的神经细胞损伤有保护作用,而且还具有促进学习记忆、促进神经系统发育和神经干细胞向神经细胞分化,防治老年性痴呆等神经系统退行性疾病等诸多重要作用。从细胞学方面来说,近年来,GBE对细胞的作用研究很多,如GBE能拮抗谷氨酸所致的脑皮质神经细胞毒性作用;GBE对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠具有保护作用;GBE对胆固醇和载脂蛋白E4(ApoE4)共损伤海马神经元胆碱能系统具有保护作用;GBE可促进分化细胞成熟,促进神经干细胞向神经元分化;GBE可拮抗谷氨酸诱导的视网膜神经细胞凋亡等[1,2]。而GBE对中脑神经细胞的保护作用及其机制的探讨未见文献报道。

    海人藻酸(KA)能使胞浆或线粒体内超氧化物岐化酶(SOD)水平降低或消失,其通过降低神经细胞对氧自由基的清除能力而使得氧自由基在神经细胞内聚集,引起细胞的继发性损伤[3~5]。因此,自由基导致细胞膜和线粒体损伤作用成为KA引起神经细胞损伤的主要因素。本文以此为模板探讨GBE对中脑神经细胞作用的机制。

    1 仪器与材料

    1.1 仪器

    电子天平(上海天平仪器厂);微量加样器(法国Gildon公司);M 200型酶标仪(瑞士Tecan公司);Mz12.5型体视显微镜(德国Leica公司);CO2培养箱(美国Shellab公司);倒置相差显微镜(日本Olympus公司);TDL-5C型台式低速离心机(上海菲恰尔分析仪器有限公司)。

    1.2 试药

    GBE(批号:071204)、左旋多聚赖氨酸(批号:070716)、MTT(批号:070416)、KA(批号:080264)均购自美国Sigma公司;DMEM干粉培养基(批号:070405),胰蛋白酶(1∶250)均购自美国Gibco公司;胎牛血清(杭州四季青生物制品有限公司,批号:080103);台盼蓝(上海欧韦达仪器科技有限公司);神经生长因子(NGF ......

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