超高效液相色谱法测定人参中人参皂苷Re 的含量
1仪器与试药,2方法与结果,1色谱条件,2对照品溶液的制备7,3供试品溶液的制备,4含量测定方法,5方法学考察,6样品含量测定结果,3讨论,1UPLC法与HPLC法的比较,2方法转换,3小结
孙全乐,蔡广知,贡济宇#(1.长春医学高等专科学校,长春130031;.长春中医药大学,长春130117)美国Waters公司在2004年推出了一种新的液相色谱技术——超高效液相色谱(UPLC)[1],它采用1.7 μm粒径的色谱柱填料,能获得更高的柱效,并且在更宽的线速度范围内使柱效保持恒定,因而有利于提高流动相流速、缩短分析时间、提高分析通量。通过性能优越的色谱柱,精确梯度控制的超高压液相色谱泵,低扩散、低交叉污染的自动进样系统及高速检测器,使UPLC的峰容量、分析效率、灵敏度较常规高效液相色谱(HPLC)[2~4]有了很大的提高,为复杂体系的分离分析提供了良好的平台。
人参皂苷是人参中的主要活性成分,已确定结构的人参皂苷至少在30种以上[5,6]。近年来,人们围绕着人参皂苷的提取、分离、结构鉴定、含量测定、药理等方面展开了深入细致的研究,而人参皂苷的含量测定方法是重点研究课题之一。目前常用的HPLC法虽可达到分离效果,但此法耗时过长、溶剂用量大、成本高。因此,笔者采用UPLC法对人参中人参皂苷Re的含量进行测定,并与HPLC法进行比较,旨在确定更高效、快速和准确的测定方法,为后续研究打下基础。
1 仪器与试药
UPLC仪,含ACQUITY UPLC紫外检测器、Empower工作站(美国Waters公司);KQ-2200E型超声波提取器(昆山市超声仪器有限公司,功率:100 W,频率:50 kHz)。
人参药材购于长春市各药房(吉林大药房、吉深大药房、永新大药房、吉林宏检公司、普天大药房、仁德大药房),经长春中医药大学张雅芝教授鉴定均为真品;人参皂苷Re对照品(中国食品药品检定研究院,批号:110810-200609);乙腈为色谱纯,水为重蒸水,其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱:Waters patened hybrid particle细内径柱(50 mm×2.1 mm,1.7 μm);流动相:乙腈-水(19∶81);流速:0.4 mL·min-1;柱温:30 ℃;检测波长:203 nm ......
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